4.培养VEEV易在鸡胚内生长，可于48小时内使鸡胚死亡。鸡胚和鸭胚原代细胞、仓鼠肾原代细胞、豚鼠细胞以及Vero细胞、BHK21细胞、L细胞和HeLa细胞等均可用于增殖病毒。细胞病变出现于接毒后约48小时。但在鸡胚细胞、HeLa细胞和豚鼠心肌细胞内连续传代后，毒力有所降低。

  5.生态学与流行病学VEE发生于南美、中美诸国以及美国南部几个州。南起南纬14°的秘鲁南部，北至北纬28°的美国得克萨斯州的中部，包括厄瓜多尔、哥伦比亚、委内瑞拉、哥斯达黎加、尼加拉瓜、洪都拉斯、萨尔瓦多、危地马拉、巴拿马、特立尼达和墨西哥，都先后或同时有过本病的暴发流行。自1935年以来，逐年或每隔几年就在哥伦比亚、委内瑞拉、特立尼达等国家出现新的暴发流行。1969年厄瓜多尔发生严重暴发，并传播给秘鲁，几个月后又暴发于危地马拉，并传给萨尔瓦多、洪都拉斯和尼加拉瓜。1970年传至哥斯达黎加和墨西哥。1971年传至美国。时至今日，该病仍在许多美洲国家流行。据报道1995年4月委内瑞拉西北部曾暴发流行该病并很快向西传播至哥伦比亚，这次流行导致大量马匹死亡，至少13000人发病。VEEV复合群的生态学与EEEV和WEEV不同。在EEEV和WEEV，鸟类是主要的病毒贮存宿主和扩大宿主，而在VEEV，鸟类的感染率较低，很少发现鸟类发病和出现病毒血症。啮齿类动物是VEEV地方株的贮存宿主和扩大宿主，马是流行株的扩大宿主。虽然地方株可使病毒生存区的马匹成为隐性感染，但马并非地方株的扩大宿主，它们主要存在于Melanoconion亚属的库蚊，形成啮齿动物-蚊-啮类动物的传播环。这些蚊生活在热带和亚热带美洲的沼泽地和森林中，在充满水生植物的池塘或小溪中繁殖。成年蚊栖息在阴暗潮湿地，但某些种类的蚊可飞至附近的房屋，它们在拂晓和黄昏出没，以多种啮齿类、鸟类和其它脊椎动物的血液为食。这种栖息地中啮齿动物在病毒循环过程中起主要作用，它们极易繁殖，在繁殖后代的过程中不断提供大量的能发展成病毒血症的宿主，从而成为传染源，使病毒容易感染易感蚊。某些鸟类、蝙蝠和其它一些沼泽的栖息者在病毒循环过程中可能起次要作用。病毒以低水平传播或持续存在于长寿命成年昆虫媒介的方式来渡过干燥季节。VEEV流行株呈马-蚊-马传播方式。病毒总能从病马体内分离到，马在病毒的扩大过程中起着重要作用,它是媒介昆虫——蚊的主要传染来源。最少有5个属的蚊，包括库蚊、按蚊、曼蚊、伊蚊和鳞蚊是VEEV的传播媒介，其中黑色库蚊可能是最主要的昆虫媒介。马属动物在实验感染后1~2天开始出现病毒血症，可持续1~6天，病马在病毒血症期间，血液中的含毒量极高，甚至高于脑组织,每ml可达105～8个小鼠半数致死量。而对蚊的感染阈为每ml105个小鼠半致死量。据估计，一匹病毒血症马在一夜之间可使数千只蚊感染。蚊在吸入含病毒血液后，病毒在中肠细胞中增殖，2～4天后进入体腔和血淋巴。随后侵入所有的器官和组织，例如卵巢、肌肉和唾液腺。病毒在蚊体内的增殖并不损害蚊的生活能力,因此，感染蚊可终生带毒，长达几周，甚至几个月。病毒在蚊体内的外潜伏期,即由吸入感染血液到具有感染性所需的时间，随环境温度和蚊种而不同。伊蚊和曼蚊在26～27℃温度下的外潜伏期为8～12天，鳞蚊可能更短一些。VEE在人和马群总是呈周期性的流行。那么在流行间歇期，病毒是怎样引发第二次疫病流行的呢?目前对这一问题还没有确切的答案，但有一些推测:①病毒存活于蚊或某些生活期较长的媒介昆虫体内，从而渡过夏季和冬眠期；②病毒长期存在于鸟和蝙蝠、野鼠、树獭等小哺乳动物体内，甚至渡过冬眠期，直到生态环境非常有利于病毒入侵和/或引起马群中疫病流行,如易感动物的数量和蚊密度的增加等；③病毒以另一种遗传形式存在于自然界，并通过一个突变和/或选择过程而显露出对马的致病性；④病毒以持续性感染的方式长期存活于病后恢复或健康动物体内；⑤地方株变异成流行株,从而引起疫病流行。以序列为基础的系统树分析以及寡核苷酸指纹图分析表明，某些流行株是由南美北部地方疫源地中的ⅠD地方株变异来的。1992年委内瑞拉发生的疫病流行就是由地方株变异来的致病株引发的；⑥灭活疫苗中残留的活病毒也可引起疫病流行。1969～1972年间同时在南美、中美和美国发生的世界上流行范围最广的一次VEE暴发可能是由ⅠA/B株引起的。最近对当时分离的毒株进行的序列分析结果表明，这次大流行可能是当时使用的灭活苗中残留的活病毒引起的。但不管怎样，VEE在10年或不到10年时间，就要在委内瑞拉、哥伦比亚、厄瓜多尔和秘鲁等国引发一次疫病流行。VEEV的传播环显然就是由马传播给蚊，再由蚊传播给马的。该病的流行具有典型的雨季特征，其传播速度决定于下列一些因素:马匹移动的程度，媒介昆虫的数量和种类以及敏感动物的数量和密度等等。病毒血症期间病马的迁移，是本病流行蔓延的一个十分重要的因素。当大部份马匹死亡或产生免疫力以后，疫病流行即告终结。人的发病通常在马发病1～2周后出现，患者也可产生较高滴度的病毒血症，从而成为蚊的感染来源，据推测可能有人-埃及伊蚊-人的传播途径，但这决不是主要途径。越来越多的研究表明气溶胶途径具有很高的传染机率，可能是一条比较重要的传播途径。实验证明VEEV可经气溶胶途径使兔发生致死性感染。豚鼠也可经呼吸道感染而发病。在实验室的病毒操作过程中，人经呼吸道发生感染的病例也有多起报道。此外已有实验证明蜱、螨可以感染VEEV，从而起到传播病毒的作用。