4.生态学与流行病学EEEV和WEEV呈蚊-鸟传播方式。蚊是病毒的传播媒介，鸟是病毒的贮存与扩大宿主。所谓扩大宿主，是指病毒在其体内大量增殖后，可以借助媒介昆虫而扩大传播范围。病毒在蚊体内的增殖已被证实，蚊在吸食含病毒的血液后，病毒主要集中在靠近腹腔的中肠内，此外胸腔部位的中肠内有少量病毒。病毒通过腹腔中肠进入肠上皮细胞增殖。病毒增殖可达较高滴度，并持续存在终生。已经证明，EEEV可以感染蚊唾液腺的腺泡细胞，并在这些细胞顶端的胞浆膜上出芽而使唾液具有感染性。蚊在感染后10天即开始由唾液腺释出病毒。蚊在感染后本身不死亡，甚至不缩短寿命。不同的蚊种对不同病毒或同种病毒有不同的易感性，宿主血液中病毒的浓度直接影响到蚊对病毒的感染。不同种的蚊对某种病毒有不同的感染阈(能使1%～5%蚊感染的病毒量)。黑尾赛蚊(Culisetamelanura)是鸟类中EEEV的主要传播媒介；长跗库蚊(Culextarsalis)是鸟类中WEEV的主要传播媒介。此外，其它种类的蚊也可能是这二种病毒的重要传播媒介,如白纹伊蚊(Ae.albopictus)对EEEV的易感性较高，可自然感染EEEV,其感染阈很低，每次吸的血液中含10个PFU的病毒即可引起感染。这种高易感性使它能够从多种病毒血症的鸟甚至马获得感染量的病毒,它在EEEV生态圈(黑尾赛蚊-燕雀类鸟)和易感哺乳动物之间起桥梁媒介作用。此外,带喙伊蚊(Ae.taeniorhynchus)也可通过叮咬接种了EEEV的鸡而感染并传播病毒。但前者比后者更易感，已证明Ae.albifasociatus可自然感染WEEV，在阿根廷它是传播WEEV的一个重要媒介，也是南美第一个被认为能传播WEEV的媒介，感染试验表明该蚊对WEEV高度易感，吸食感染鸡血造成蚊感染的ID50为0.5个Vero细胞PFU。鸟类对EEEV和WEEV十分易感，在病毒的传播过程中，它们扮演着极其重要的角色,起着扩大宿主的作用。不同种类的鸟对EEEV表现出不同的感染特性。绝大多数鸟感染病毒后只出现短暂的病毒血症(持续数天时间)，随后产生较强的免疫反应，而不表现任何发病征兆或症状。但也有少数种类的鸟和家禽，如鸣鹤、鸵鸟、野鸡、火鸡和鸡等感染后可发病死亡。疫病流行前数周，常可从当地的鸟群中检测出病毒抗体，甚至分离到病毒，因此鸟类可作为监视EEEV和WEEV活动以及疾病流行的“哨兵”，所以称之为监测动物(sentinel)。鸡是这2种病毒以及其它虫媒病毒的主要监测动物。EEEV和WEEV的传播与蚊和鸟类的分布密切相关。目前EEEV和WEEV分布只局限于整个美洲，尚未见于世界其它地区。EEEV存在于地方疫源地的生态环境中，这些疫源地主要分布于美国东海岸和墨西哥湾，以及北至加拿大南部，南达加勒比群岛，此外还分布于美国内陆地区及中、南美洲许多国家，如危地马拉、墨西哥、巴拿马、哥伦比亚、巴西、阿根廷、厄瓜多尔、圭亚那、秘鲁和委内瑞垃。WEEV主要分布于美国西部各州和加拿大西部的一些省份，其次分布于南美一些国家，甚至扩展到阿根廷。此外,美国东部也曾从蚊和鸟体内分离到WEEV。在北美,EEEV以黑尾赛蚊为传播媒介，它几乎只吸食燕雀类鸟(passerinebirds)的血液。所以病毒长期存在于黑尾赛蚊-燕雀生态圈内，使疫源地的鸟群有较高的感染率。据报道，在美国新泽西洲南部的EEEV疫源地，燕雀类鸟有较高EEEV抗体阳转率，62%的兰色坚鸟、60%的画眉鸟和44%的小山雀都呈抗体阳性。在南美,库蚊(Culex)是EEEV(南美毒株)的地方性媒介，病毒存在于疫源地的库蚊-鸟生态圈内。这种严格的嗜鸟习性和狭小的生态范围限制了该种蚊将病毒传播给马和人的可能性,它只是鸟类感染的病毒来源。在地方性疫源地，鸟类就成了病毒的扩大宿主，它为能造成疾病流行的伊蚊和Coquillettidia提供了充足的含毒血液。在美国西部，长跗库蚊是WEEV的主要媒介，鸟是扩大宿主，病毒主要存在于长跗库蚊-鸟生态圈内。而在美国东部和大西洋沿岸的一些淡水沼泽栖息地，WEEV可能存在于黑尾赛蚊-鸟生态圈。除蚊-鸟传播方式外，病毒可能还存在蚊-蚊传播方式。Jensen等(1994)通过野外研究发现黑点伊蚊(Ae.melanimon)可水平传播WEEV，它是美国加州一山谷地带中WEEV传播圈的重要媒介。Fulhoust等(1994)通过实验证明WEEV可在背点伊蚊(Ae.dorsalis)及相近种类的伊蚊中垂直传播，这可能是WEEV在北美温带地区维持传播的重要机制。但目前尚未发现EEEV能在蚊体垂直传播。除蚊外，其它无脊椎动物在传播EEEV和WEEV上具有一定的意义。Durde等(1993)报道，将成年雌性螨放置于人工感染EEEV并产生病毒血症的鸡的体表，寄生30天后，螨体内可检测到病毒，带毒螨还能将病毒传播至正常鸡，证明螨也可传播EEEV。也曾在越冬的小啮齿类，甚至爬行类和两栖类动物体内分离到EEEV和WEEV。如在危地马拉，曾发现一些蝙蝠对这两种病毒和VEEV呈现血清阳性，这些动物也可能参与病毒的传播环。Gebhardt等(1966)发现长跗库蚊可将西方型马脑炎病毒传播给蛇。鼠类的互相啮食，可能是鼠类中疾病传播的一个原因。笼养鸟也可因相互啄咬而直接传播。但是这些都不是主要的传播方式。人与马是非固有的感染对象，在特定的环境中，如进入病毒的生态圈，才有可能感染病毒，人和马感染后发生病毒血症的时间极短，血液中的病毒浓度也低，不足以感染蚊，故在生态学上并不起重要作用，所以称其为“终点宿主”。但是EEEV和WEEV，特别是前者能引起人和马发生严重的脑炎，有较高的死亡率，所以是极其重要的人兽共患疫病病原。在北美，特别是美国东方型马脑炎和西方型马脑炎是一大重要的公共卫生问题。美国疾病控制中心每年都要公布当年全美虫媒病的流行情况,EEEV和WEEV以及其它能引起脑炎的甲病毒的传播与疾病流行情况是其中的重要内容。这两种病毒在美国得到了深入细致的研究。虽然它们受到世界上其它没有该病毒传播的国家和地区的广泛重视，但对它们的认识主要来自美国的研究工作。EEEV和WEEV引起人、马和其它哺乳动物的疫病流行，主要是通过其它种类的蚊传播的，它们被称为桥梁媒介，如烦扰伊蚊(Ae.sollicitans)。有些蚊兼嗜鸟血、马血和人血，则是鸟类和人畜中的病毒传播媒介，例如骚扰伊蚊(Aedesvexans)可能是将EEEV由鸟类传播给人和马的主要媒介；而长跗库蚊，在秋季可改变食性而叮咬人畜，则是人和马感染西方型马脑炎病毒的主要媒介。EEEV和WEEV的传播方式，决定疫病流行的季节性。温带地区通常在夏初开始零星发生，夏秋流行，11月中旬以后停熄。流行暴发与蚊的密度呈现明显相关。11月后开始霜冻，蚊死亡，疾病也就停止流行。马是EEEV和WEEV的靶子宿主。发病率一般不超过30%。前者死亡率很高，可达90%，后者死亡率较低，一般20%～30%，有时可达50%。总的来说，发生十分严重的人或马脑炎，就预示着可能是东方型马脑炎。在美国，该病小规模暴发几乎年年都有，在东北部各州及佛罗里达，大量的马匹散在发病，偶尔也有死亡数百匹马的严重暴发。地方性EEEV的十分局限的滋生地可能反映它对媒介——黑尾赛蚊的严格需求。这种蚊越冬时成为幼虫，它需要阴暗、富含有机质的潮湿环境。美国东部有这样的环境。另外，成年蚊的群体密度可以反映诸如雨量和温度等气候因素的变化。东方型马脑炎流行的条件是在地方性流行地既需要大量的黑尾赛蚊群及与之相适应的易感鸟群，同时还需要兼有嗜鸟血习性和嗜人或马血习性的其它蚊群作为疫病的传播媒介。这样复杂的条件就限制了东方型马脑炎的分布与流行范围，所以该病在动物和人群中的发生机率较低,而且地理上严格地限制在地方性流行区域。与东方型马脑炎一样，西方型马脑炎也只能流行于特定的地理环境，但它的流行不如东方型马脑炎频繁。在美国西部,WEEV四季不断地存在于长跗库蚊-鸟生态圈。来自这种地方生态圈的传播虽然可能单独导致有限人数的感染，但主要还是在引起马群中疫病流行的同时才伴有人群发病。近年来，美国已采取缩小马群。实施马的免疫和加强传播媒介的控制等措施，以达到减少西方型马脑炎在人群和马群中流行的目的。尽管这样，马群中还是有该病的暴发流行，并伴有人的发病和死亡，所以它仍是一种重要疫病。而在美国东部,WEEV存在于靠大西洋沿岸的淡水沼泽栖息地的黑尾赛蚊-鸟生态圈。病毒与黑尾赛蚊的紧密关系以及该蚊独特的嗜鸟血习性可以解释该地区没有西方型马脑炎暴发的原因，即生态限制使得该病不易在东部的人和马群中流行。在南美一些国家西方型马脑炎仍是一种重要传染病，因为在这些国家，马还是一种主要驮畜。但马群中该病的暴发并没有伴随人的发病(阿根廷)。这也可能与生态限制有关，受该地区生态因素的影响，如缺少有效的嗜人血的蚊媒介，或者南美毒株在毒力上存在差异。EEEV和WEEV的传播与疫病流行具有明显的季节性，主要发生于温暖的夏、秋季节。那么病毒是如何得以越冬和持续存在的呢?有以下二种推测:①病毒存活于生命周期较长的媒介昆虫体内，随它们冬眠而越冬，或者可以经卵传播，因为在越冬蚊体内已经多次分离到病毒，也有经卵传播的报道；②持续存在于某种或某些脊椎动物体内，这类宿主反复发生慢性感染，体内长期带毒，在一定的气温和其它环境因素，特别是动物机体在某些生理因素的激发下，病毒大量增殖，呈现病毒血症而成为感染蚊的病毒来源。因为在冬季曾多次从小型啮齿类、两栖类和爬行类动物体内发现病毒。但欲彻底阐明EEEV和WEEV的越冬问题,尚需进行更多的研究工作。目前还没有证据表明鸟类在其远距离的南北迁徙过程中，能把病毒传播他乡，因为南、北美毒株之间存在着比较明显的抗原差异，而且进化的起源也不一致。