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青钱柳愈伤组织培养条件研究的优化三



录入时间:2009-7-7 8:58:16 来源:青岛海博

3 讨论
0.1
%的升汞溶液是目前我国常用的灭菌消毒剂,不同的外植体用升汞溶液消毒的时间不同,消毒时间过长会损伤外植体细胞,使材料出现褐色坏死,消毒时间过短又不能消毒彻底。从试验结果看,用青钱柳叶片做外植体,0.1 %升汞溶液的消毒时间应掌握在3 4 min 内,用茎段做外植体,消毒时间应掌握在14 min 左右,此时的污染率较低,愈伤组织诱导率较高。
以不同时期的外植体做试验材料,发现以5 月份采集的当年生的茎段做青钱柳组织培养的外植体最适合,愈伤组织诱导率高,且褐化现象较轻。而以叶片做外植体,愈伤组织诱导率很低,可能此时的叶片已经不再幼嫩,或叶片中次生代谢含量产物最高,褐化现象普遍发生,以致于抑制了愈伤组织的形成。
通过向MS 培养基和改良MS 培养基中添加不同浓度的6-BA NAA ,以寻找青钱柳最适宜的基本培养基,发现MS 和改良MS 均可诱导出青钱柳茎段的愈伤组织,但改良MS 培养基愈伤组织诱导率更高,且褐化现象较轻,更适合青钱柳茎段愈伤组织的培养。
本试验虽然成功的找到了适合青钱柳愈伤组织培养的培养条件,但在培养过程中褐化现象发生仍旧普遍。因此,进一步探索褐化现象发生的原因、采取相应的措施减少褐化现象、提高愈伤组织的诱导率是今后一个主要的工作方向。

 

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