犬冠状病毒(Canine coronavirus) 犬冠状病毒引起犬的胃肠炎,1971年首次在美国发生腹泻军犬的粪便中电镜检出病毒 。犬冠状病毒性腹泻原为比较缓和的疾病,病犬大多能够康复,但因经常与犬细小病毒等发 生混合感染,而引起严重乃至致死性转归的疾病。近年来世界上许多国家和地区都有本病流行的报告,我国亦已多次发现本病暴发。
1.形态特征犬冠状病毒具有冠状病毒的一般形态特征。呈圆形或椭园形,长径80~120nm,宽 径为75~80nm。有囊膜,囊膜表面有花瓣状纤突,长约20nm。核衣壳呈螺旋状。
2.理化学特性病毒内含单链RNA,在氯化铯中的浮密度为115~116g/cm3。对乙醚和氯仿 敏感。对酸有较大抵抗力,且常随毒株而不同。
3.抗原性犬冠状病毒在血清学上与猪传染性胃肠炎病毒具有比较密切的关系,虽然犬冠 状病毒不感染猪,但猪传染性胃肠炎病毒却可使犬发生亚临床感染。犬冠状病毒与猫传染 性腹膜炎病毒和人冠状病毒229E株亦具有相关抗原,它们共同构成1个抗原群,但犬冠状病 毒本身似乎只有1个血清型。此外,近年来在水貂及饲养貉和狐中常有冠状病毒性腹泻发生 ,症状与犬冠状病毒性肠炎相似,但它们之间在抗原性上是否相关,尚不清楚。
4.培养犬冠状病毒可在犬的多种原代和传代细胞上增殖并产生细胞病变,包括原代肾和 胸腺细胞以及A72、CRFK和FCWF等传代细胞,据介绍,FCWF细胞对犬冠状病毒非常敏感。 但由病料初代分离病毒相当困难。病毒分离用材料必 须新鲜,最好是先将病料实验感染健康幼犬,待其典型发病时采取腹泻粪便标本,经抗菌等 处理后,立即接种细胞。反复冻融的病料常常不能产生阳性病毒分离结果。当细胞培养物出 现细胞病变时,即可应用以特异高免血清制备的荧光抗体进行鉴定,也可直接将细胞培养物 作电镜和免疫电镜检查。也可试用濒死期幼犬肾脏直接进行细胞培养以分离病毒,据云可获 较高的阳性分离率。但用犬源原代或继代细胞分离病毒时,应注意其自身带毒问题。病毒在 细胞浆内复制,由内质网和胞浆空泡膜上出芽成熟。
5.病原性各种品种和年龄的犬都易感,但幼犬症状较重。潜伏期1~3天,常迅速蔓延全群 。病犬精神萎顿,厌食,呕吐,随后排稀软带粘液的糊状粪便,灰白色或黄白色,常有恶臭 , 有时呈水样,橙色至绿色,含有血液。病犬迅速脱水,消瘦,但体温常不明显升高。多数病 例在7~10天内康复,但某些幼犬可能呈严重症状,并因发热、脱水和衰竭而死。人工感染 未吃初乳的新生幼犬易于引起疾病,幼犬常在喂饲含病毒材料后1~3天死于出血性胃肠炎。 最近发现自然分娩的新生仔犬在出生后1~2天突然死亡,死后剖检见胃肠炎,电镜检查粪 便和肠内容物见有大量典型的冠状病毒。甚至在产出的死胎的胎粪中亦发现有冠状病毒 ,从而证明犬冠状病毒垂直感染的可能性。发病初期白细胞数减少。水和电解质代谢紊乱。病变为轻重不同的胃肠炎。尸体严重脱水,肠壁菲薄,肠管扩张,内含黄白色至黄绿色液体 ,有时还有气体和血液。肠粘膜充血和出血,肠系膜淋巴结肿大。病理组织学检查可见小肠 绒毛萎缩变短,隐窝深陷,粘膜固有层的细胞成分增多,上皮细胞变平以至呈短柱形。混合感染,特别是与犬细小病毒发生混合感染时,症状与病变严重,死亡率显著增高。
6.诊断实验室诊断方法中以电镜和免疫电镜检查最为快速和准确,由于 犬粪便中的病毒粒子极多,且具特征性的形态结构,常可在1小时内确定结果。应用ELISA双抗体夹心法可成功地检出粪便样品中的冠状病毒抗原。酶标抗体的 制备方法是:用PEG沉淀和蔗糖密度梯度超速离心法由腹泻粪便中提取冠状病毒。将此病毒 制品注射豚鼠,制备抗血清,提取IgG并以过氧化物酶标记。本法具有较好的特异性 和敏感性,检测结果堪与电镜相比。对于幼犬,血清学检查抗体的价值不大,因其可能是母源抗体,也可能是其它相关病毒引起 的 非特异性抗体,但是急性期和恢复期的双份血清抗体检测,则具有一定的回顾性诊断意义。 犬 冠状病毒引起的中和抗体效价较低,检测时可用低剂量病毒(30~50TCID50)在A72细 胞上进行微量实验。应当注意,国内外均发现健康犬带毒和排毒现象,外表健康犬粪便中的病毒电镜阳性检出率 高达20%以上,血清学检测亦有类似的阳性检出率。因此,犬冠状病毒可能普遍存在于犬体 ,只在机体因疲劳、营养缺乏或因寄生虫病和其它疾病衰弱时,才致病而呈现临床症状 ,同时大量散毒而引起严重流行
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