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鸡传染性支气管炎病毒(一)



录入时间:2009-7-6 17:17:47 来源:青岛海博

鸡传染性支气管炎病毒(Avian infectious bronchitis virus)鸡传染性支气管炎是鸡的一种急性、高度接触传染性呼吸道疾病。其特征为病鸡咳嗽,喷嚏 ,发出气管口[KG-*8]罗音;幼鸡流鼻液 ,蛋鸡产蛋数量和质量下降;肾型病鸡肾肿大、苍白,有大 量尿酸盐沉积等。鸡不分年龄、性别和品种均易感,但主要侵害1~4周龄的幼鸡。鸡传染性 支气管炎病毒(IBV)是冠状病毒科冠状病毒属的代表种。鸡传染性支气管炎首先在1931年报道于美国,1936年确定本病的病原为病毒,1937年,该病 毒在鸡胚内传代获得成功。现在美国、加拿大、英国、意大利、比利时、南斯拉 夫、日本和印度等地均有鸡传染性支气管炎的发生。我国1972年首次在广东发现该病,近年 来流行较广。
1.形态特征鸡传染性支气管炎病毒粒子略呈球形,直径约80~120nm,有时呈多形性。在 鸡胚尿囊液制备的负染标本中,可见囊膜上有许多梨状纤突,呈放射状排列,纤突长约20 nm,末端呈球形,纤突之间有较宽的间隙。这种纤突易从病毒粒子上脱落。将鸡胚尿囊液中 的病毒置4℃18小时,作负染常可看到梨状纤突的大量失落。Bingham和Almeida( 1977)观察了鸡传染性支气管炎病毒的内部结构,发现由RNA和蛋白质组成的螺旋状核衣壳 宽约9~16nm,呈长颈瓶 样或圈状。 
2.基因组结构特点IBV基因组具有冠状病毒基因组的一般结构特点 。Boursnell等(1987)测定了其全部序列,共有27 608nt(包括poly(A)尾),它比目前所知的 其它任何RNA病毒都要大得多,5'末端和3'末端具有明显的同源性。5'末端20kb为1个单一 基因,它很可能转录翻译成依赖于RNA的RNA聚合酶。分析此20kb基因序列,发现有两个开放 阅读框架(ORF),分别为ORF1和ORF2。由负股RNA转录成的6种mRNA具有相同的3'末端,5'端 的 先导序列约为60nt。mRNA E、C和A分别编码病毒的3种主要结构蛋白S、M和N,这3种mRNA 的总长约为87kb。IBV基因组结构见图23-4。图23-4IBV基因组结构示意图——自Boursnell
3.血凝性未经处理的IBV不能凝集红细胞,但是鸡胚尿囊液中的病毒以1%胰蛋白酶 (或乙醚)在37℃处理3小时之后,则能凝集鸡红细胞。但IBV并不含有血凝素糖蛋白HE,一 般认为,这是由于鸡胚尿囊液中有1种能吸附病毒和红细胞表面的血凝素抑制物,它能阻止 病毒吸附红细胞。用胰蛋白酶或乙醚处理后,这种抑制物遭到破坏,因而能发生血细胞凝集 作用。这种反应 是非特异性的,至今尚未证实特异性抗血清的血凝抑制作用。但是,Cunningham(1966)曾用DEAE柱层析法,从感染性病毒中分离出血凝素,直径为60~70nm。 这种血凝素由51%蛋白质、34%脂质和少量糖类以及RNA组成。
4.干扰现象鸡传染性支气管炎病毒能干扰鸡新城疫病毒在雏鸡、鸡胚和鸡胚肾细胞培养物内的增殖,而 鸡脑脊髓炎病毒则又能干扰鸡传染性支气管炎病毒在鸡胚内的增殖。有人认为传染性支气管 炎病毒能对鸡体内的败血性支原体(Mycoplasma gallisepticum)和鸡嗜血杆菌(Haemophil us gallinarum)呈现协同作用。
5.理化学特性鸡传染性支气管炎病毒粒子含单链RNA,对RNA酶敏感。5溴脱氧尿核苷和5氟 脱氧尿核苷不 能抑制病毒增殖,因而证明其核心内含RNA,而不是DNA。IBV有14~16种多肽,其中4 种是糖基化的。蔗糖浮密度为112~114g/cm3。对酒精、乙醚、氯仿、胆盐和其它脂 溶剂敏感。用 乙醚或吐温80破坏病毒粒子,不能使其像副粘病毒那样释出核蛋白片段——核衣壳。病毒的热稳定性随毒株的不同而异,例如新分离毒株可被56℃15~30分钟灭活,而适应于鸡 胚的毒种可在此温度中存活3小时以上。鸡胚尿囊液中加入20%马血清,可提高病毒对热的稳 定性。水中的病毒在室温最少存活24小时。1mol/L氯化镁可以提高病毒在50℃的稳定性。 病毒在 低温保存稳定。鸡胚尿囊液和细胞培养物中的病毒,可在-30℃~-60℃存活几个月。冻干真 空密封的病毒,在低温下存活可达24年,但在37℃存放6个月,则完全灭活。将含病毒组织 置于50%甘油盐水中,也能良好保存。Dubose等报道鸡胚尿囊液病毒在pH2和pH12中,室温放置1小时,仍有活力,但是 其他学者认为并非所有的鸡传染性支气管炎病毒都有这样的耐酸、耐碱能力。病毒在pH78 稳定性最好。鸡传染性支气管炎病毒虽被认为对乙醚敏感,但20%乙醚只能降低病毒的滴度,而 不能使其完全灭活。02%去氧胆酸钠溶液在室温下作用10分钟,即能完全灭活鸡胚尿囊液 中的病毒。鸡传染性支气管炎病毒有抵抗胰蛋白酶的作用 ,每毫升含胰蛋白酶40mg的胰蛋白酶溶液在37℃ 1小时,不影响病毒的感染性。1%煤酚、1/万高锰酸钾、70%酒精和1%福尔马林均可在室温条件下几分钟内杀死病毒。但1% 石炭酸在室温下1小时,不能灭活病毒。
  6.抗原性已经报道的鸡传染性支气管炎病毒血清型有马萨诸塞(Massachusetts)、康涅狄格 (Connecticut)、霍尔泰(Holte)、格兰(Gray)、JMK、衣阿华97(Iowa97)、衣阿华609(Iowa  609)、特拉华2868(Delaware 2868)、特拉华2897(Delaware 2897)、SE17、克拉克333(Clar k 333)、佛罗里达(Florida)和阿肯色99(Arkansas 99)等13个。Hopkin(1974)应用固定 量病毒和不同量血清的交叉中和试验,对19个蚀斑纯化的毒株进行比较研究,结果将其分为 7个血清型,即马萨诸塞型、康涅狄格型(佛罗里达、克拉克333、衣阿华99)、佐治亚型(Geo rg ia)、SE17型、特拉华型(JMK、霍尔泰、格兰)、衣阿华97型、衣阿华609型和新罕布什尔(Ne w Hampshire)型。另外还有第8个血清型,即澳大利亚T株。有人认为鸡传染性支气管病毒就 只有马萨诸塞和康涅狄格两个主要血清型,其它可能都是一些变型。引起肾变病型的毒株主 要是澳大利亚T株、霍尔泰型、格兰型及马萨诸塞型。在我国流行的毒株主要是马萨 诸塞型。各血清型之间没有或仅有部分的交互免疫作用,因此常给本病的诊断和预防带来一 定的困难。应用乙醚处理和氯化铯密度梯度离心分层的病毒悬液,在免疫琼脂扩散试验中至 少可以测出3种不同的可溶性抗原(免疫琼脂扩散板上有3条沉淀线):1种存在于病毒粒子 内,其余2种分布于病毒的表面。

 

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