植物组织培养技术在蓖麻上的应用研究二
录入时间:2009-7-2 14:21:31
来源：青岛海博
2 国外蓖麻组织培养研究情况
2.1 蓖麻组织培养研究进展
2.1.1 组织培养的起始材料研究Sujatha 等以具丰富分生组织细胞的芽尖（shoottip ）和胚轴为外植体进行了蓖麻离体再生体系研究。通过试验得出：胚轴及其附近组织在培养基上迅速膨大，说明这些分生组织细胞分裂速度非常快。随后在无任何愈伤组织形成的情况下膨大的胚轴上直接分化出很多芽。这些芽经培养可以伸长、生根而再生成完整植株。
sujatha等对离体再生能力与基因型的关系进行研究，认为每个外植体再生芽的数量在蓖麻不同的基因型之间并无明显的差异。他们认为这种再生芽数量上的差异主要反映不同部位外植体再生能力的差异，并推测不同外植体对激素反应的差异是由于不同部位的细胞对激素的吸收和识别有差异，或者是由于激素作用机制的不同而造成的。
2.1.2 培养基和激素的作用Sujatha 等使用MS 基本培养基，只是在再生芽的生根阶段将基本培养基减半。证明基本培养基对蓖麻离体培养植株再生没有显著的影响。Sujatha 等为了测试对蓖麻组织培养芽再生最适的激素种类和浓度，在实验中分别使用了0.5 ~l0.0 mg/L的腺嗦吟、BA、激动素、TDz和玉米素团。结果发现，在测试的所有浓度的腺嘌呤中，胚轴外植体只发育成单独的植株（即原有胚芽的萌发）而无任何增殖；激动素对潜伏芽的生长有作用（平均每个外植体产生1.0 一3.3 个芽）。同样是胚轴外植体，TDZ 对丛生芽的形成有显著作用，在TDZ 培养基上培养一段时间后转到BA 培养基，获得了较高的芽增殖率（每个外植体产生33.3 一40.0 个芽）。而对于芽尖外植体，在BA 培养基上获得的再生芽数相当高，并在BA 浓度为2.0mg/L时达到最高（每个外植体产生46.7 个芽） 。在0.5mg/L腺嘌呤的情况下这个数字最低（每个外植体产生5.0 个芽）。此外，以胚轴为外植体时，他们发现了一个有趣的现象，即在BA 、Kn 和ZT 培养基上，不定芽发生之后其数量保持恒定，没有进一步增殖。但在TDZ 培养基上每个独立的外植体的芽数却在不断地增加。然而，在TDZ 培养基上比较高的增殖指数却伴随着芽的伸长受到抑制，他们用继代培养的方法解决了这一问题。
Sujatha 和Reddy 通过研究建立了一个比较成熟的蓖麻植株再生体系，并证明了TDz 有较高的细胞激素活性，在蓖麻组织培养中有积极的作用。实际上从20 世纪80 年代初起蓖麻的组织培养研究一直没有中断过，只是研究结果不甚理想，难以满足遗传转化研究的需求。Athma 等只在25 ％一30 ％的实验中经10 - 20d 的培养从蓖麻芽尖获得了单个的芽。Sangduen 等报道了从芽尖获得了多芽的增殖，但没有提供每个外植体产生芽的比率。在Reddy 等的实验中，79.1 ％的培养物平均产生5.2 个芽。Molina 等在1mg/LBA 培养基上获得的最大值为每个外植体4.4 个芽。Ahn等（2006 ）同样用胚轴作外植体，在20 umol/LBA 培养基上每个外植体平均产生6.8 个芽，在1umol/LTDZ 培养基上每个外植体为13.3 个芽，而当使用1umol/LTDZ 并经7d 的黑暗处理时，平均每个外植体产生的芽数上升到24.2 个。
2.2 蓖麻遗传转化研究进展
蓖麻遗传转化研究起步较晚，仅有的少量研究在2005 年以后才陆续报道。sujatha 等于2005 年首次报道获得了转基因蓖麻植株。在此之前Mckeon 等于2000年向美国专利局提交了“蓖麻转化”的专利申请（2003 年9 月公开）。而Malathi 等于2006年报道了他们通过遗传转化方法获得了抗虫的蓖麻转基因植株。
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