欲作病毒分离的材料，无论是上代病毒培养物，还是采自发病或死亡动物的病料 ，都应尽快送往实验室作病毒分离或鉴定。一般情况下，如果运送或保存不超过4天，则标 本应置于中性溶液中，于4℃ 保存，不要冷冻，因为一次冻融远比短期保存于上述条件下引起的病毒感染滴度下降多得多 ，-10℃～-20℃的冷冻会使大多数病毒的感染性严重下降。如长期保存，可冻存于-30℃或 更低的温度，-30℃低温保存的病毒材料(除少数例外)，至少可以存活几个月以上；而-70℃低温保存的病毒，甚至几年不见毒力降低。怀疑为疱疹病毒的感染材料，应置-50℃或4℃保存，因为疱疹病毒在-20℃的存活时间反而不如4℃。不过，将感染材料磨碎后置于-20℃的甘油或脱脂牛乳中，则可保存几个月，而 感染力并不明显下降。由现场采取病料，操作必须迅速，特别是在夏热季节，应尽快将病料置冰盐 混合的冰瓶内(温度可达零下几度到十几度)，送往实验室或冷藏地点。对脑炎病毒、流感病 毒和口蹄疫病毒等，这可能是关系到病毒分离能否成功的关键。
(一)病毒材料的准备 如果只是将某种病毒培养物作病毒传代，则吸取少量原培养物种入新的细胞培养 瓶中即可。在溶(杀)细胞性病毒，由于细胞破坏，绝大多数的病毒粒子释出于细胞外的营养 液内，因此应用上清液作为接种物。但在细胞结合性病毒，例如某些疱疹病毒，应将细胞冻 融几次，促使细胞崩解，并用大口吸管充分吹打，用其悬液作为接种物。由动物病料分离病毒时，需根据病料种类作适当的处理：〖ZZ(〗脑、肝、肌肉等器官或组织〖ZZ)〗〓取一小块，充分剪碎后置乳钵中加石英砂研 磨，或加入到玻璃研磨器中研磨。随后加 入5倍量的Hanks液(内含200μg／ml链霉素和200单位／ml青霉素)，制成乳剂后移入灭菌 试管中。如果条件许可， 可以将其置于预冷至-20℃以下的酒精中迅速冷冻，并速置37℃温水中融化，使细胞内的病 毒充分释出。以2000r/min的速度离心沉淀10分钟后取上清液作接种物。〖ZZ(〗鼻液、 乳汁、 脓汁等分泌物或渗出物〖ZZ)〗〓这类分泌物或渗出物内经常含有大量细菌，所以应加入 高浓度的 抗生素作预处理。即用内含青、链霉素的Hanks液(每毫升含1 000单位及1 000μg的青、链 霉素)将其稀释3～5倍，充分混匀悬浮后，置4℃冰箱内感作2～4小时或过夜，如上离心沉淀 后取上清液作接种用。〖ZZ(〗咽喉拭子〖ZZ)〗〓仔细用棉试子擦拭咽喉部，并迅速将 其泡入盛有2～5ml Hanks液 的试管内，Hanks液内含2%犊牛血清和相应浓度(200～500单位或μg／ml)的青、链霉素。充 分涮洗棉拭子，并如上法反复冻融3～5次后，收集液体部分，以2 000r/min的速度离心沉 淀10分钟后取上清液作接种用。〖ZZ(〗粪便〖ZZ)〗〓可用棉拭子插入肛门沾取，或扑杀 发病动物后由肠管采取，低温保存。接种前将其如上述鼻液的处理方法那样，稀释于含有2% 犊牛血清的Hanks 液内，但稀释倍数应达10～20倍。抗菌素含量为每毫升1 000单位(青霉素)和1 000μg(链霉 素)。4℃感作4小时或过夜后，以2 000r/min的速度离心沉淀10分钟，取上清液作接种用 。〖ZZ(〗无菌的体液或鸡胚液〖ZZ)〗〓可不作任何预处理，直接作接种用。
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