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病毒糖类的提取



录入时间:2009-6-26 9:32:32 来源:青岛海博

 
糖是所有病毒核酸的组成成份之一,有些病毒还含有葡萄糖基嘧啶,另一些病毒则含有糖蛋白。病毒囊膜的主要成份是糖蛋白,通常位于病毒粒子的表面,使它们具有血清学活性。下面是提纯禽肿瘤病毒糖类的方法:
(1)用1%SDS(内含005mol/L]2巯基乙醇)在37℃裂解提纯病毒30分钟,在此裂解物中加入5倍体积的乙醇,沉淀病毒的糖蛋白,将此沉淀物溶于01%SDS,01mol/L]TrisHCl](pH8.0)中;
(2)用饱和酚抽提病毒糖蛋白,取水相加入5倍体积的乙醇(内含2mol/L]NH4Ac)沉淀回收病毒糖蛋白,再用75%的乙醇洗一次,溶于01%SDS,01mol/LTris中;
(3)用灰色链丝菌酶1mg/ml处理48小时,再用0.05mg/ml的浓度处理48小时,以水解糖蛋白;(4)水解的糖蛋白通过SephadexG50凝胶层析过滤法,分离获得糖类。

 

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