15.初代培养时,外植体出现发白,慢慢枯死,是什么原因的?
答:外植体的初代培养出现这种情况,是比较好理解的。大田植物材料离体以后,进入不同环境中继续生存代谢,需要一个过渡。首先,植物材料要吸收培养基的养分,不再是根吸收,盐类浓度相对于离体的植物材料的吸收能力可能是过量的,植物材料退色就是叶绿素形成受阻和细胞代谢受阻,另外还有培养基养分供应的有效性滞后,另外还有植物材料本身内含物向培养基的流失等等。建议在初代培养阶段最好先采用空白培养。
16.75%的酒精和70%的酒精有什么区别,组培时用那种好?
答:酒精的70%和75%都是可以的,但往往由于桶装酒精的浓度达不到95%,这样按照70%的配制就达不到要求了,因此我们一般是桶装按照75%的配,瓶装则用70%的配。
17.大型灭菌器在灭菌的时候总会出现个别瓶子破裂的现象,请教是什么原因?是温度过高,压力过大,还是内部冷热不均造成的呢?
答:高压灭菌造成玻璃瓶的破裂,特别是大型灭菌装置,我想最主要还是在放气冷却时造成的。究其原因,应该是在放气时,由于容积较大,压力在不同位置(内外部)的变化速度并不相同,致使瓶内与瓶外的压力差距较大,如果是封口膜,表现的可能就是塑料膜的破裂。
18.做培养基时可以用自来水吗。稀释药剂可以用吗。可以用砂糖吗。我看不懂培养基用量表。谢谢解答。主要是换算。如ms培养基硝酸钾用量1650mg,碘化钾0.025mg,甘胺酸0.0001mg。1mg,1l,1g到底是多少。我个人想自己做ms。没有分析天平。怎么办。
答:在实际生产中,自来水经过简单处理就可以作为组培用水。但若配药就需要用蒸馏水或纯净水。大量元素母液的配制可以根据实际需要进行选择倍数,比如硝酸钾用量1650mg/L,如配成20倍,就需称1.650*20=33g,以此类推,按照正确顺序溶解定溶到1L即可,配培养基时量取的体积就是1000/20=50ml,依次推算即可。
另外,如果您的配药条件不是很好,我建议可以应用干粉培养基,这样可以节省很多投资和时间。
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