一、培养基明细:
名称 规格 价格(元)
碱性蛋白胨水(APW) 250g 70
TCBS琼脂 250g 95
三糖铁琼脂(TSI) 250g 85
双糖铁琼脂(KIA) 250g 85
T1N1琼脂 250g 85
精氨酸葡萄糖斜面琼脂(AGS) 100g 385
Hugh-Leifson葡萄糖肉汤(HLGB) * *
MR-VP肉汤 20支 15
ONPG胨水 20支 35
Andrade氏糖类肉汤 250g 80
Andrade氏指示剂 100ml 50
氧化酶试剂 1g 50
粘丝试验溶液 * *
革兰氏染色液 5ml*8 40
5%红细胞生理盐水 * *
50万单位多黏菌素B纸片 * *
10ug和150ugO/129纸片 * *
霍乱弧菌诊断血清(O1群) 1ml*12 480
霍乱弧菌诊断血清(O139群) 1ml 50
二、备注:
1、依据SN/T 1022—2001出口食品中霍乱弧菌检验方法 适用于出口水产品及其它食品的检验。
2、术语:
霍乱弧菌:为革兰氏阴性菌,菌体弯曲呈弧状或逗点状,菌体一端有单根鞭毛和菌毛,无荚膜与芽胞。经人工培养后,易失去弧形而呈杆状。细菌运动极为活泼,呈流星穿梭运动。营养要求不高,在PH8.8~9.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这一PH不易生长,故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基。在碱性平板上菌落直径为2mm,圆形,光滑,透明。
霍乱弧菌能还原硝酸盐为亚硝酸盐,靛基质反应阳性,当培养在含硝酸盐及色氨酸的培养基中,产生靛基质与亚硝酸盐,在浓硫酸存在时,生成红色,称为霍乱红反应,但其他非致病性弧菌亦有此反应,故不能凭此鉴定霍乱弧菌。EL Tor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌生化反应有所不同。前者Vp阳性而后者为阴性。前者能产生强烈的溶血素,溶解羊红细胞,在血平板上生长的菌落周围出现明显的透明溶血环,古典型霍乱弧菌则不溶解羊红细胞。个别EL Tor型霍乱弧菌株亦不溶血。根据弧菌O抗原不同,分成Ⅵ个血清群,第Ⅰ群包括霍乱弧菌的两个生物型。第Ⅰ群A、B、C三种抗原成份可将霍乱弧菌分为三个血清型:含AC者为原型(又称稻叶型),含AB者为异型(又称小川型),A、B、C均有者称中间型(彦岛型)。霍乱弧菌对热,干燥,日光,化学消毒剂和酸均很敏感,耐低温,耐碱。湿热55℃,15分钟,100℃,1~2分钟,水中加0.5ppm氯15分钟可被杀死。0.1%高锰酸钾浸泡蔬菜、水果可达到消毒目的。在正常胃酸中仅生存4分钟。
3、粘丝试验溶液:溶解0.5g去氧胆酸钠于100ml水中,拧紧瓶盖保存于冰箱中,无需高压灭菌。霍乱弧菌在钙溶液中被乳化后,1min内形成粘液状团块。当粘块从玻片上被拉出2cm—3cm时呈粘丝。
4、Hugh-Leifson葡萄糖肉汤(HLGB):
配方:
蛋白胨 2.0g
酵母浸粉 0.5g
氯化钠 30.0g
葡萄糖 10.0g
溴甲酚紫 0.015g
琼脂 3.0g
蒸馏水 1000ml
制法:将各成分(溴甲酚紫除外)加入蒸馏水中,充分混匀,搅拌加热溶解调节pH7.4,加入溴甲酚紫,混匀,分装于15mm*150mm试管的1/3容量,121℃高压灭菌15min。接种后覆盖约1ml灭菌矿物油以检查葡萄糖发酵。
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