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食品卫生微生物学检验大肠菌群测定2——GB



录入时间:2009-1-9 15:13:12 来源:青岛银河澳门官网入口

7.1检样稀释
7.1.1以无菌操作将检样259 (mL)放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000r/min~10000r/min的速度处理1min,做成l:10的均匀稀释液。
7.1.2用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注人含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。
7.1.3另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做l0倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管.
7.1.4根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度,接种三管。
7.2乳糖发酵试验将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发醉管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种三管,置36℃ 士1℃ 温箱内,培养24h士2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。
7.3分离培养将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36℃ 土1℃ 温箱内,培养18h~24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。
7.4证实试验在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1个一2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置36℃ 士1℃ 培养箱内培养24h士2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。
7.5报告根据证实为大肠菌群阳性的管数,煮MPN检索表.报告每100mL (g)大肠菌群的MPN值。
8粪大肠菌群(Faecal coli介朋)
8.1用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见7.2)转种于EC肉汤管内,置“44.5℃ 士0.2℃ 水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面),培养24h士2h,经培养后,如所有EC肉汤管均不产气,则可报告为阴性;如有产气者,则将所有产气的EC肉汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上,置培养18h-24h,凡平板上有典型菌落者,则证实为粪大肠菌群阳性。
8.2结果报告根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群的MPN值。   
   

 

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