7.1检样稀释
7.1.1以无菌操作将检样259 (mL）放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器，以8 000r／min～10000r/min的速度处理1min，做成l：10的均匀稀释液。
7.1.2用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1mL，注人含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混匀，做成1：100的稀释液。
7.1.3另取1mL灭菌吸管，按上条操作依次做l0倍递增稀释液，每递增稀释一次，换用1支1mL灭菌吸管．
7.1.4根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择三个稀释度，每个稀释度，接种三管。
7.2乳糖发酵试验将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1mL以上者，用双料乳糖胆盐发醉管，1mL及1mL以下者，用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种三管，置36℃ 士1℃ 温箱内，培养24h士2h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。
7.3分离培养将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，置36℃ 土1℃ 温箱内，培养18h～24h，然后取出，观察菌落形态，并做革兰氏染色和证实试验。
7.4证实试验在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落1个一2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置36℃ 士1℃ 培养箱内培养24h士2h，观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。
7.5报告根据证实为大肠菌群阳性的管数，煮MPN检索表．报告每100mL (g）大肠菌群的MPN值。
8粪大肠菌群（Faecal coli介朋）
8.1用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物（见7.2）转种于EC肉汤管内，置“44.5℃ 士0.2℃ 水浴箱内（水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面），培养24h士2h，经培养后，如所有EC肉汤管均不产气，则可报告为阴性；如有产气者，则将所有产气的EC肉汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上，置培养18h-24h，凡平板上有典型菌落者，则证实为粪大肠菌群阳性。
8.2结果报告根据证实为粪大肠菌群的阳性管数，查MPN检索表，报告每100mL(g）粪大肠菌群的MPN值。   
   

 

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