一、基本原理
酵母菌的子囊孢子生成与否及其形状,是酵母分类上的重要依据。一部分酵母菌只有当它在最适条件下,才能观察到形成的子囊孢子,不同种属的酵母菌,形成子囊孢子的条件不同。葡萄糖-醋酸盐培养基特别有利于酿酒酵母子囊孢子的形成。本实验用生长在此培养基上的酿酒酵母为材料,进行子囊孢子的观察。
二、器材
酿酒酵母;
吕氏碱性美蓝染液,石炭酸复红染液,3%的酸性酒精,孔雀绿芽孢染液,麦芽汁琼脂斜面培养基,葡萄糖-醋酸盐培养基等。
三、操作步骤
1.将酿酒酵母先移种到新鲜麦芽汁琼脂斜面上,25℃培养24小时左右。如此活化二次后,备用。
2.用接种环取活化后的培养物,接种到葡萄糖-醋酸盐斜面上,25℃培养二周左右。
3.用接种环挑取少许生长在葡萄糖-醋酸盐培养基上的酿酒酵母于载玻片上,制成涂片,干燥、固定。
4.用两种方法进行染色。一种方法是加石炭酸复红染液于固定涂片处,在火焰上加热5—10分钟(不能沸腾),用酸性酒精冲洗30—60秒钟,再用水洗去酒精,加吕氏碱性美蓝染液数滴,数秒钟后用水洗去,水干后置显微镜下观察,结果孢子为赤色,菌体为青色;另一种方法是用孔雀绿芽孢染液进行染色,但无需加热,干后置油镜下观察子囊孢子。
四、实验报告
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