6.5.4 煌绿水溶液
煌 绿 0.5g
蒸馏水 100.0mL
溶解后,存放暗处,不少于1d,使其自然灭菌。
6.5.5 牛胆盐溶液
牛胆盐 10.0g
蒸馏水 100.0mL
加热煮沸至完全溶解,高压灭菌121℃,20 min。
6.5.6 制备
基础液 900.0mL
硫代硫酸钠溶液 100.0mL
碘溶液 20.0mL
煌绿水溶液 2.0mL
牛胆盐溶液 50.0mL
临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入基础液中,每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分。最后分装于灭菌玻璃瓶内,每瓶100mL或225mL。
6.6 亚硫酸铋琼脂(BS)
蛋白胨 10.0g
牛肉膏 5.0g
葡萄糖 5.0g
硫酸亚铁 0.3g
磷酸氢二钠 4.0g
煌 绿 0.025g或5g/L水溶液5mL
柠檬酸铋铵 2.0g
亚硫酸钠 6.0g
琼 脂 18.0g
蒸馏水 1000.0mL
将前三种成分加入300 mL蒸馏水中(制作基础液),硫酸亚铁和磷酸氢二钠分别加入 20mL和30mL蒸馏水中,柠檬酸铋铵和亚硫酸钠分别加入另一20mL和30mL蒸馏水中,琼脂加入600mL蒸馏水中。然后分别搅拌均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解。冷至80℃ 左右时,先将硫酸亚铁和磷酸氢二钠混匀,倒入基础液中,混匀。将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠混匀,倒入基础液中,再混匀。调至pH7.5±0.1,随即倾入琼脂液中,混合均匀,冷至 50~55℃。加入煌绿溶液,充分混匀后立即倾注平皿,每皿约20mL。
本培养基不需要高压灭菌,在制备过程中不宜过分加热,避免降低其选择性,新配制的培养基呈玉白色不透明,贮于室温暗处,超过48h会降低其选择性,本培养基宜于当天制备,第二天使用。
6.7 胆硫乳琼脂(胆盐 硫化氢 乳糖琼脂 DHL)
蛋白胨 20.0g
牛肉膏 3.0g
乳 糖 10.0g
蔗 糖 10.0g
牛胆盐 2.0g
硫代硫酸钠 2.2g
柠檬酸钠 1.0g
柠檬酸铁铵 1.0g
中性红 0.03g或5g/L水溶液6mL
琼 脂 16.0g
蒸馏水 1000.0mL
除中性红和琼脂外,将其他成分加入400 mL蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10 min,加热煮沸至完全溶解,调至pH7.3±0.1。另将琼脂加入600mL蒸溜水中,搅拌均匀,静置约 10min,加热煮沸至完全溶解。将两种溶液混合后,再加入5g/L中性红水溶液6mL,搅拌均匀,冷至50~55℃,倾注平皿,每皿约20mL。
本培养基不需高压灭菌,也不再进行任何加热。制成的平板为橙黄色。
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