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    出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法——3



    录入时间:2008-12-26 13:12:19 来源:青岛银河澳门官网入口

    8 大肠菌群固体培养基测定法
    8.1 样品制备同第4章。
    8.2 计数
    8.2.1 选取适宜的三个连续稀释度的样品液,每个稀释度接种两个灭菌平皿,每皿1mL。另取1mL稀释剂加入一个灭菌平皿中,作空白对照。
    8.2.2 将冷至45±0.5℃的结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)10~15mL倾注于每个平皿中。小心旋转平皿,将培养基与样液充分混匀。
    8.2.3 待琼脂凝固后,再加3~4mL VRBA覆盖平板表层。
    8.2.4 翻转平板,置于36±1℃培养18~24h。
    8.2.5 选用有30~150个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。典型菌落为紫红色,菌落周围有红色的胆盐沉淀环。菌落直径为0.5mm或更大。
    8.2.6 证实
    8.2.6.1 从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落,移种于BGLB肉汤管内, 36±1℃培养24h和48h,观察产气情况。
    8.2.6.2 将出现产气的肉汤管判为大肠菌群阳性。对形成菌膜的阳性管,应进行革兰氏染色,以便排除革兰氏阳性杆菌。
    8.2.7 结果报告:经最后证实为阳性(产气,革兰氏阴性杆菌) 的试管百分比乘以于8.2.5条中计数的平板菌落数,再乘以稀释倍数,即为每克(毫升)样品中大肠菌群数。  
    例:10**-4样品稀释液1mL,在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落,挑取其中10个接种BGLB肉汤管,证实有6个阳性管,则该样品的大肠菌群数为:100×6/10×10**-4/g(mL)=6.0×10**5/g(mL)   
       

     

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