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我国行业标准-出口食品中霍乱弧菌检验方法——2.0



录入时间:2008-12-25 13:42:51 来源:青岛银河澳门官网入口 

                附录 A   培养基和试剂的配制
A1  碱性蛋白胨水(APW)
蛋白胨                10.0g  
氯化钠                10.0g  
蒸馏水               1 000mL   
混匀后,调节pH值至(8.5±0.2),分装225mL于250mL广口瓶中,121℃高压灭菌10min。
A2  TCBS琼脂
酵母浸膏                  5.0g  
蛋白胨                   10.0g
蔗 糖                   20.0g  
硫代硫酸钠·5H2O           10.0g
柠檬酸钠 ·2H2O            10.0g
牛胆酸钠                    3.0g  
牛胆汁                      5.0g   
氯化钠                    10.0g  
柠檬酸铁                   1.0g  
溴麝香草酚蓝               0.04g  
麝香草酚蓝                  0.04g
琼 脂                    18.0g
蒸馏水                    1 000mL 
除指示剂外,将各种成分加热溶解,调至pH8.6,加入指示剂。此培养基不必高压灭菌,煮沸1~2min,分装20mL于15mm×100mm平皿内。
A3  三糖铁琼脂(TSI)
牛肉浸膏                  3.0g
蛋白胨                    20.0g
乳 糖                     10.0g
蔗 糖                    10.0g
葡萄糖                     1.0g
硫酸亚铁                    0.5g
氯化钠                    30.0g
琼 脂                    12.0g
酚 红                   0.024g
 除琼脂和酚红外,将其他成分用蒸馏水400mL微火加热溶解,同时将琼脂置于600mL蒸馏水中,浸泡数分钟后,加热煮沸使完全溶解。然后将以上两液混合均匀。调至pH7.4,  加入指示剂混匀,分装于15mm×150mm试管,每管3mL~4mL,115℃高压灭菌15min。灭菌后摆成斜面,使高层和斜面各约3cm。 
A4  双糖铁琼脂(KIA)
牛肉浸膏                   3.0g
酵母膏               3.0g
月示蛋白胨             15.0g
蛋白胨                      5.0g  
         乳糖                 5.0g  
         葡萄糖                1.0g
硫酸亚铁                    0.2g  
         氯化钠                20.0g  
         硫代硫酸钠              0.3g  
         琼脂                 12.0g  
         酚红                 0.024g  
        蒸馏水                1 000mL  
   将各成分溶解于蒸馏水中,充分混匀,搅拌加热,煮沸约1min。最终pH(7.4±0.2)。分装13mm×100mm试管,121℃高压灭菌15min。放置高层斜面备用。   
   
   
   

 

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