9 培养基及试剂
9.1 30 g/L氯化钠稀释液
氯化钠 30.0g;
蒸馏水1000mL
加热溶解,调至pH7.0,121℃高压灭菌15 min,以无菌操作分装于500mL广口瓶或500mL三角瓶,每瓶450 mL以及17mm×170mm试管,每管9mL,做稀释样品用。
9.2 60 g/L 氯化钠蛋白胨水(PW)
蛋白胨 10.0g
氯化钠 60.0g
蒸馏水 1000mL
将各成分加热溶解,调至pH7.2,分装于17mm×170mm试管,每管10mL。120℃高压灭菌15min。
9.3 氯化钠多粘菌素B肉汤(SPB)
酵母浸膏 3.0g
蛋白胨 10.0g
氯化钠 20.0g
多粘菌素B 250单位/毫升培养基
蒸馏水 1000mL
将各成分(除多粘菌素B外)加热溶解,稍冷后加入多粘菌素B,调至pH7.4。分装于17mm ×170mm试管,每管10mL。121℃高压灭菌15min。灭菌后,立即将培养基取出放凉。
9.4 硫代硫酸钠、柠檬酸钠、胆盐、蔗糖琼脂(TCBS)
酵母浸膏 5.0g
蛋白胨 10.0g
氯化钠 10.0g
柠檬酸钠 10.0g
硫代硫酸钠 10.0g
胆酸钠(以牛胆酸钠代替) 3.0g
牛胆汁粉(以混合胆盐代替) 5.0g
蔗 糖 20.0g
柠 檬酸铁 1.0g
琼 脂 18.0g
溴麝香草酚蓝 0.04g
麝香草酚蓝 0.04g
蒸馏水 1000mL
除指示剂外,将各种成分加热溶解,调至pH8.6,加入指示剂。此培养基不必高压灭菌,煮沸1~2min,待培养基稍凉后倾注平板。 在该平板上,溶藻胶弧菌为黄色菌落,而副溶血性弧菌为蓝绿色菌落。肠球菌、变形菌及大肠菌群有时也会生长,但其菌落一般较小,易与副溶血性弧菌区别。
9.5 氯化钠三糖铁琼脂(TSI)
牛肉浸膏 3.0g
蛋白胨 20.0g
乳 糖 10.0g
蔗 糖 10.0g
葡萄糖 1.0g
硫酸亚铁 0.5g
硫代硫酸钠 0.5g
氯化钠 30.0g
琼 脂 12.0g
酚 红 0.024g
除琼脂和酚红外,将其他成分用蒸馏水400mL微火加热溶解,同时将琼脂置于600mL蒸馏水中,浸泡数分钟后,加热煮沸使完全溶解。然后将以上两液混合均匀。调至pH7.4, 加入指示剂混匀,分装于15mm×0mm试管,每管3~4mL,115℃高压灭菌15min。灭菌后摆成斜面,使高层和斜面各约3cm。
9.6 嗜盐性试验用胰胨水(TB)
胰 胨 40.0g
酵母浸膏 12.0g
蒸馏水 4000mL
完全溶解后,分成4份,其中3份分别加入30g、70g、100g氯化钠,使成0%、30g/L、 70g/L、00g/L不同浓度的氯化钠胰胨水。调至pH7.5。分装15mm×150mm试管,每管7mL。 121℃高压灭菌15min。
上一篇:我国进出口检验行业标准-副溶血性弧菌检验方法——2
下一篇:我国进出口检验行业标准-副溶血性弧菌检验方法——4