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中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中蜡样芽孢杆菌——4



录入时间:2008-12-19 13:49:13 来源:青岛银河澳门官网入口

附 录 A 培 养 基 制 备 (补充件)
A1 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂培养基(MYP)  
a.  基础琼脂      
牛肉膏 1.0g     
蛋白胨 10.0g     
D-甘露醇 10.0g     
氯化钠 10.0g     
琼 脂 15.0g     
酚 红 0.025g(配成溶液加入)     
蒸馏水  稀释至900mL  
b. 50%卵黄液 50mL  
c. 多粘菌素B 100 IU/mL  
  将a.中的前5种成分加入蒸馏水中加热溶解,校正pH至7.2±0.1,加入酚红溶液,混匀后分装烧瓶中,每瓶225 mL。121℃高压灭菌15min。用时加热溶化,冷至50℃后每瓶加入50%卵黄液12.5mL和2.5mL多粘菌素B溶液,混匀后倾注灭菌平皿,每皿15~18mL。用前应将平板置室温约24 h。 
 注:①50%卵黄液:取鲜鸡蛋,用硬刷将蛋壳彻底洗净,沥干,放于70%酒精溶液中浸泡1 h。以无菌操作取出卵黄,加入等量灭菌生理盐水,混匀后备用。 
 ②多粘菌素B溶液:在50mL灭菌蒸馏水中溶解500 000国际单位的无菌硫酸盐多粘菌素B。
A2 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤    
胰酪胨 17.0g    
植物胨           3.0g    
氯化钠           5.0g    
磷酸氢二钾         2.5g    
葡萄糖           2.5g    
蒸馏水          稀释至1000mL   
pH7.3±0.1  
  将上述各成分溶解在蒸馏水中,煮沸2min,分装大试管,每管15 mL,121℃高压灭菌15min。临用时每管加入0.5%多粘菌素B溶液0.1mL混匀即可。 
 注:多粘菌素B溶液:在33.3mL灭菌蒸馏水中溶解500 000国际单位无菌硫酸盐多粘菌素B。
A3 酚红葡萄糖肉汤    
(月示)胨          10.0g    
牛肉膏           1.0g    
氯化钠           5.0g    
葡萄糖           5.0g    
酚 红          0.018g(配成溶液加入)    
蒸馏水           稀释至1000mL       
pH7.4±0.1 
 将除酚红外的各成分溶解于蒸馏水并稀释至1000mL。校正pH后加入酚红溶液,混匀,分装试管,每管3 mL。121℃高压灭菌10min备用。最终pH7.4±0.1
A4 硝酸盐肉汤    
牛肉膏           3.0g    
蛋白胨           5.0g    
硝酸钾           1.0g    
蒸馏水           稀释至1000mL    
pH7.0±0.1 
 将上述各成分溶解于蒸馏水并稀释至1000mL。校正pH后分装试管,每管5mL,121℃高压灭菌15min。
A5 营养琼脂    
牛肉膏           3.0g    
蛋白胨           5.0g    
琼 脂 稀释至1000mL    
pH7.2±0.1 
 将各成分于蒸馏水中加热溶解。校正pH后分装试管,每管5~7mL;或分装烧瓶,每瓶100~150mL。121℃高压灭菌15 min。将试管取出,制成斜面;如制平板,可将灭菌的琼脂冷至45~50℃倾注灭菌平皿,每皿18~20mL。
A6 L-酪氨酸营养琼脂    
营养琼脂 100mL     
5%灭菌L-酪氨酸悬液 10mL 
 将100mL营养琼脂溶化,冷至45℃,加入5%的灭菌L-酪氨酸悬液10mL,充分混匀后,分装试管,每管3.5mL。制成的斜面应迅速冷却防止L-酪氨酸分离而出。 
 注:L-酪氨酸悬液:将0.5g酪氨酸加10mL蒸馏水混匀,121℃高压灭菌15min。   
   

 

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