5.2 平板表面计数法
适用于检查金黄色葡萄球菌数不小于10/g(mL)的食品。
5.2.1 选三个连续稀释度,从每个稀释度分别取1 mL稀释样液,接种至3 个表面干燥的Baird-Parker琼脂平板上(如:0.4mL-0.3mL-0.3mL)。
5.2.2 以L形玻璃棒将接种物涂布于琼脂表面,避免涂到平板边缘,将平板正置直至接种物被培养基吸收,将平板翻转,36±1℃培养45~48 h。
5.2.3 挑选有20~200个菌落的平板进行计数。如果有数种菌落皆类似金黄色葡萄球菌,则分别计算和记录每一类型的菌落数。当最低稀释度的平板的菌落数小于20时,仍可选用。如平板上的菌落数大于200,其中有些菌落具有典型金黄色葡萄球菌的外观,同时在其高倍稀释度未出现典型菌落者,亦可用这些平板进行金黄色葡萄球菌计数,但不能把非典型菌落计算在内。
5.2.4 从可计数的各类型菌落中至少各选取1个菌落,参照5.1.3~5.1.4条进行凝固酶试验。
5.2.5 报告结果 将呈凝固酶阳性的菌落所代表的3 个平板上的菌落数相加,并乘以样品稀释倍数,即以此数报告为所检查食品中的金黄色葡萄球菌数/g(mL)。
5.3 非选择性增菌法
适用于检查含有受损伤的金黄色葡萄球菌的加工食品。
5.3.1 取1 : 10稀释的样品液10 mL,接种于10 mL双料胰蛋白胨大豆肉汤中,36±1℃培养2h。
5.3.2 再加入20mL含20%氯化钠的单料胰蛋白胨大豆肉汤,36±1℃培养24±2h。
5.3.3 取上述培养物0.2 mL,分别涂布于2个表面干燥的Baird-Parker琼脂平板上,36±1℃培养46±2h。
5.3.4 从每个平板上至少挑取1个可疑金黄色葡萄球菌菌落,参照5.1.3~5.1.4条进行凝固酶试验。
5.3.5 报告结果 如发现有凝固酶试验阳性的菌落,即报告1g(mL)食品中有金黄色葡萄球菌存在,否则为阴性。
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