免疫学方法检测HBV标志物是临床最常用的HBV感染的病原学诊断方法。HBV具有三个抗原抗体系统,即HbsAg与抗-HBs、HbeAg与抗-HBe、HbcAg与抗-HBc。由于HBcAg在血液中难以测出,故临床进行的免疫学检测不包括HBcAg,只检测抗HBc,抗-HBc分为抗-HBc lgM和抗-HBc lgG,故常称为“两对半”检测。
检测方法以放射免疫法和酶联免疫吸附法最为敏感。ELISA是临床应用最广泛的方法,常用夹心法、间接法或竞争法ELISA。HIBV抗原与抗体的免疫学标志与临床关系较为复杂,必须对几项指标综合分析,为临床提供辅助性诊断。
1、HBsAg和抗-HBs:HBsAg是HBV感染后第一个出现的血清学标志物,也是诊断乙型肝炎的重要指标之一。也可发现无症状携带者,是筛选输血员所必须的指标。HBsAg阳性见于急性肝炎、慢性肝炎或无症状携带者。急性肝炎恢复后,一般在1-4个月内HBsAg消失,持续阳性6个月以上则认为转为慢性肝炎。无症状HBsAg携带者是指肝功能正常的乙肝患者。在急性感染恢复期可检出抗-HBs,一般是在HBsAg从血清消失后发生抗-HBs血清阳转。从HBsAg消失到抗-HBs出现的这段间隔期, 称为核心窗口期,此期可以短至数天或长达数月。此时,抗-HBc lgM是
HBV感染的惟一的血清学标志物。抗-HBs是一种中和抗体,是乙型肝炎恢复的一个重要标志。抗-HBs对病毒的再感染具有保护作用,可持续数年。抗-HBs出现也是乙肝疫苗免疫接种成功的标志。
2、HBeAg和抗-HBe:HBeAg是一种可溶性抗原,是HBV复制及血清具有传染性的指标,在潜伏期与HBsAg同时或在HBsAg出现稍后数天就可在血清中检出。HBeAg持续存在时间一般不超过 10周,如超过则提示感染转为慢性化。HBeAg具有抗原性,可刺激机体产生抗-HBe。抗-HBe出现于HBeAg阴转后,其出现比抗-HBs晚,但消失早。HBeAg阴转一般表示HBV复制水平降低,或趋于停止,传染性下降,病变趋向恢复。
3、HBcAg和抗-HBc:HBcAg存在于HBV的核心部分以及受染的肝细胞核内,是HBV存在和复制活跃的直接指标。血液中不易检测到。HBcAg抗原性强,在HBV感染早期即可刺激机体产生抗 -HBc,较抗-HBs的出现早得多,早期以lgM为主,随后产生lgG型抗体。常以抗HBc lgG作为急性HBV感染的指标,但慢性乙肝患者也可持续低效价阳性,尤其是病变活动时。急性感染恢复期和慢性持续性感染以抗HBc lgG为主,可持续存在数年。抗HBc lgG不是保护性抗体,不能中和HBV。
HBV抗原、抗体检测主要用于:①乙型肝炎诊断;②乙型肝炎病情程度、疗效及预后的判断;③筛选献血员;④乙肝疫苗预防接种免疫效果监测;⑤饮食服务、保育员、饮水管理人员健康检查指标之一;⑥流行病学调查。
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