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肺炎支原体lgM检测



录入时间:2008-12-3 14:47:17 来源:青岛银河澳门官网入口

【原理】 肺炎支原体快速检测卡可检测血清中的肺炎支原体lgM抗体。患者的血清样品分别加入两个测试孔内,当样品沿膜扩散时,分别加入3滴抗人lgM碱性磷酸酶复合物、3滴洗液和2滴底物,5分钟后观察结果。质控孔为质量控制,固定有人lgM,测试孔固定有肺炎支原体抗原。阳性反应结果为蓝色,阴性结果为无色。 
【材料】 
1、患者血清。 
2、肺炎支原体lgM检测试剂盒,包括: 
(1)检测卡:单独锡纸包装,卡上固定有肺炎支原体抗原或人lgM(质控孔)。 
(2)阳性质控液(1.7ml):含有人抗肺炎支原体lgM的0.1%叠氮钠缓冲液。 
(3)阴性质控液(1.7ml):0.1%叠氮钠缓冲液。 
(4)酶结合物:(11ml):含有以碱性磷酸酶标记的抗人lgM单克隆抗体的0.1%叠氮钠缓冲液。 
(5)洗液:9.5%(W/V)的呱基氢氯酸。 
(6)底物(15ml):含有5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸的0.1%叠氮钠的缓冲液。 
(7)移液管。 
【样本处理】血清样品2—8℃可保存3天,如果不能在此期间测试,-20℃保存,样品不宜反复冻融。 
【操作】 
1、从冰箱中取出试剂盒,置室温平衡20分钟。 
2、从锡纸袋中取出检测卡,作好标记。 
3、用移液管滴加2滴血清到卡下端两个测试孔中。 
4、22—25℃下孵育2分钟。2分钟内血清应沿膜扩散至上端的测试孔中。 
5、加入3滴酶结合物到下端两个测试孔中,22—25℃下孵育2分钟,酶结合物应沿膜扩散至上端的测试孔中。 
6、加入3滴洗液到上端两个测试孔中,等待完全吸收。 
7、滴加2滴底物试剂到上端两个测试孔,22—25℃下孵育5分钟,5分钟后立即观察反应结果。 
【结果】  根据上端两个反应孔的反应结果判断: 
阳性结果:上端两孔都出现蓝色。提示肺炎支原体性lgM存在。 
阴性结果:质控孔出现蓝色或轻微蓝色,测试孔无色或呈暗灰色,提示不存在肺炎支原体lgM或其浓度在检测下限之下。 
无效反应:质控孔不出现蓝色。产生无效反应的可能原因为:试剂或检测卡质量问题,操作不当,样品扩散不好,酶结合物严重污染,血清中含有过多脂质成分等。无污染血清可离心后再次测试 。 
【特异性】该试剂盒与下列因素不发生交叉反应:腺病毒、风湿因子、呼吸道合胞病毒、抗核抗体、流感病毒A型和B型、副流感病毒3型、组织胞浆菌、巨细胞病毒等。   
   

 

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