荧光密螺旋体抗体吸收实验用Nichols株梅毒螺旋体抗原悬液在玻片上涂成菌膜，吸附待检血清中的lgG抗体，再用荧光素标记的羊抗人lgG抗体，显示待检血清中含有的抗螺旋体抗体。因待检血清预先经吸附剂去除了非特异性抗体，故特异性较高。一般用于筛选实验阳性标本的确诊实验。 
1、操作步骤 
（1）抗原片制备：Nichols株梅毒螺旋体（每高倍视野20条）抗原悬液，在玻片上涂数个直径为5mm的菌膜，干后以甲醇固定。 
（2）待检血清预处理：待检血清先经56%30分钟灭活，取50ul血清与200ul吸附剂（Reiter株非致病密螺旋体）混匀，37℃作用30分钟，以充分吸除非特异性抗体。 
（2）夹心法荧光显色：吸附后的待检血清用磷酸盐缓冲液（PBS）作1;20—1:320的倍比稀释，将稀释后的血清分别滴加于抗原菌膜上，置湿盒内37℃孵育30分钟，然后用PBS洗片，并将玻片在PBS中浸洗，换液3次，每次5分钟，吹干。各抗原反应片上滴加工作浓度荧光素标记的羊抗人lgG抗体，置湿盒37℃孵育30分钟，再用PBS按前法洗片，干后用甘油缓冲液封片。 
（3）荧光显微镜观察：每次实验设阳性、阴性、非特异性血清对照。阴性标准血清无荧光菌体或偶尔见荧光菌体出现：阳性对照可见多数（高倍视野15条）荧光菌体出现。并以此为参照作出待检标本的判定。 
   结果判定：阳性结果参照阳性标准血清的荧光强度判定：半数高倍视野（10条左右）出现荧光，则为（+ +），多半视野呈荧光（15条左右 ）则为（+ + +），全部（约20条）出现强荧光则为（+ + + +）。“可疑”结果参照非特异性血清的荧光强度判定为（+ +）或（+），阴性结果参照阴性对照血清判定为（-）或（+）。    
   

 

上一篇：快速血浆反应素环状卡片实验（RPR）

下一篇：伯氏疏螺旋体的血清学实验