【原理】同试管法。
【材料】10*6孔塑料板,其他同试管法。
【方法】
1、取10*6孔塑料板1块(每排10孔,共6排),于每排第1孔左侧分别标明“H、O、
A、B”以表示各排孔中将分别加入伤寒沙门菌鞭毛抗原(H)、伤寒沙门菌菌体抗原(O)、甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原(A)、肖氏沙门菌鞭毛抗原(B)。
2、血清预稀释取可疑患者血清0.4ml,加至1.2ml0.9%氯化钠溶液中,混匀即得1:4稀释的血清。
3、稀释血清:用1ml吸管从装有1.6ml1:4可疑患者血清的试管中吸取0.8ml放入塑料板每排第1孔,每孔0.2ml。再用另一吸管取1.2ml0.9%氯化钠溶液加入上述试管中作对倍稀释,即为1:8的血清,另换吸管吹吸混匀,再取0.8ml放入每排的第二孔,每孔0.2ml。如此操作至每排第6孔止。每排孔内血清原始稀释度分别为1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128。
4、于每排第7孔各加0.9%氯化钠溶液0.2ml,作为抗原对照。
5、加抗原于第1排各孔加伤寒沙门菌鞭毛抗原(H),于第2排各孔加伤寒沙门菌菌体抗原(O),于第3排各孔加甲型副伤寒沙门菌鞭毛抗原(A),于第4排各孔加入肖氏沙门菌鞭毛抗原(B),每孔均为0.2ml。加入菌液后,每孔血清又稀释1倍,故血清最终稀释度应为1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256。
6、将塑料板轻轻来回摇动,使抗原与血清充分混匀,置室温下,15min分钟后观察结果。记录方法参见试管法。
【注意】因塑料板法所用的抗原及血清均较试管法浓缩10倍,因此,在确定血清效价后应扩大10倍,使其与试管法结果报告一致。例如塑料板法为1:8,则报告为1:80.
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