结核分枝杆菌,简称结核杆菌,1882年RObeu Koch所发现,列人分枝杆菌属,是家畜、野生动物、禽类及人类结核病的病原菌.
(一)生物学特性
1.形态与染色特性
在动物病灶内的结核杆菌菌体正直或微弯曲,长1.5~4.0um,宽0.2~0.5um.有时菌体末端具有不同的分枝,有的两端钝圆,无鞭毛,无荚膜和无芽孢,没有运动性。单在,成双.间或成丛排列.在人工培养基上,由于菌型.菌株和环境条件不同.可出现多种形态.如近似球形.棒状或丝状.在电镜下观察本菌具有复杂结构:由微荚膜:细胞外壳的三层结构、胞浆膜、胞浆.间体,核糖体及中间核质构成。 本菌为革兰氏阳性菌。一般苯胺染料难以着色。若用加热或媒染剂处理使之染色后,可以抵抗盐酸.酒精的脱色作用。萋-尼二氏对结核杆菌的抗酸染色法.就是根据这个道理进行的,因为结核杆菌中含有脂类,染料一旦进入细胞内部很难脱出。用上述方法染色,结核杆菌被染成红色,而其他非杭酸性菌和细胞杂质均呈蓝色。
2.培养特性
本菌为严格需氧菌;最适生PH6.5—6.8,最适生长温度为37~37.5℃。本菌生长速度很慢,尢其是初代分离.在人工培养基上最快分裂速度为18h一代,一般1~2周才看见开始生长.3~4周才能旺盛的发育。
结核杆菌对营养要求极高,必须在含有血清.鸡蛋。甘油.马铃薯及某些无机盐的特殊培养基上.才能良好地生长。初代分离培养,更是如此。在固体培养基上.菌落呈灰黄白色.干燥颗粒状.显著隆起.表面粗糙皱缩.菜花状的菌落。在液体培养基内,于液面形成粗纹皱膜,培养基保持透明。若加入吐温80于培养基中.可使结核杆菌呈分散均匀生长。
3.生化特性
结核杆菌不发酵糖类.能产生过氧化氢酶。人型结核杆菌能合成烟酸.还原硝酸盐.耐受噻吩—2—羧酸酰肼,牛型结核杆菌都不具备上述特性。人型和牛型的毒株,中性红试验均阳性,无毒株,则中性红阴性且失去索状生长现象.
4.抵抗力
本菌因含有大量的脂类,抵抗力较强,对于干燥的抵抗力特别强大。它在干燥状态可存活2—3个月,在腐败物和水中存活5个月,在土壤中存活7个月到1年,低温菌体不死,而且在零下190℃时还保持活力。在乳中加热到85℃,经过30min,煮沸经过3—5min 死亡。室温下在乳中能存活9~10d,奶油中为—周.干酪中为4个月.在消毒药品(5%石炭酸.2%来苏水)作用下。结核杆菌一般经过2~14h死亡。
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