利用抗生素在液体培养基中对试验菌生长的抑制作用，通过测定培养后细菌浊度值的大小，比较标准品与供试品对试验菌生长抑制的程度，测定供试品效价的一种方法。美国、英国、日本等国药典中均有收载，《中国药典》（2005年版 ）也已收载。国内北公司已开发了抗生素比浊法测量仪，可用于浊度法测定抗生素效价。
浊度法测定原理是分别加入抗生素标准品和供试品的已接种有试验菌的培养液中，因不同浓度的抗生素对试验菌的抑制作用不同，在一定时间内，通过测量培养基内试验菌浓度（浊度）变化就可确定供试品的效价。浊度法因在液体中进行，所以不受扩散因素的影响，因此不会像管碟法那样易受如钢圈的放置、向钢圈内滴液的速度、液面的高低、菌层厚薄等种种因素影响抗生素在琼脂表面扩散，而造成结果的差异或试验的失败，也就是说不受一切扩散因素的影响。同时，该法测定时间短，培养34h则可有结果，杯碟法需要16—24h（如磷霉素含量测定需培养24h）。再者，误差小，管碟法可信限率为5%，最大可达7%（如中国药典2000年版的红霉素含量测定项下，规定的可信率为不大于7%，而本法约在1%—3%，同时可进行自动化测定，易实行规范化操作。
1、浊度法菌悬液的制备
（1）金黄色葡萄球菌悬液取金黄色葡萄球菌的营养琼脂斜面培养物，接种于营养琼脂斜面上，在35—37℃培养20—22h。临用时，用灭菌水或0.9%灭菌氯化钠溶液将菌苔洗下，备用。
（2）大肠埃希菌悬液取大肠埃希菌的营养琼脂斜面培养物，接种于营养琼脂斜面上，在35—37℃培养20—22h。临用时，用灭菌水将菌苔洗下，备用。
（3）白色念珠菌悬液取白色念珠菌的改良马丁琼脂斜面的新鲜培养物，接种于10ml培养基IX中，置35—37℃培养8h，再用培养基IX稀释至适宜浓度，备用。
2、标准品溶液的制备标准品的使用和保存，应照标准品说明书的规定。临用时照规定进行稀释。
标准品的品种、分子式及理论计算值见表。具体操作如下：
（1）称量要求同管碟测定法。
（2）稀释标准品与供试品溶液的稀释应采用容量瓶，每步稀释，取样量不得少于2ml为宜，稀释步骤一般不超过3步。
（4）标准品溶液按《中国药典》各品种含量测定项下要求，制成一定浓度的标准品贮备液。在各品种项下规定的剂量反应线性范围内，以线性浓度范围的中间值作为中间浓度，标准品溶液选择5个剂量，剂量间的比例应适宜（通常为1：1.25或更小）。
3、供试品溶液的制备供试品根据估计效价或标示量，按标准品溶液制备方法，选择中间浓度，选择至少2个剂量，每一剂量不少于3个试管。
4、含试验菌液体培养基的制备临用前，取规定试验菌悬液适量（35—37℃培养3—4h后测定的吸收值在0.3—0.7之间，且剂距为2的相邻剂量 间的吸光度差值不小于0.1，加入到各规定的液体培养基中，混合，使在试验条件下能得到满意的剂量一反应关系和适宜的测定浊度。已接种试验菌的液体培养基应立即使用。
5、检定操作方法采用标准 曲线法进行检定。
（1）线性试验取适宜的大小厚度均匀的已灭菌试管，在各试验管内精密加入含试验菌的液体培养基9.0ml，再分别精密加入各浓度的标准品溶液各1.0ml，立即混匀，按拉丁方或随机区组分配，将各管在规定条件下培养至适宜测量的浊度值（通常约为4h）。
（2）样品规定取适宜的大小厚度均匀的已灭菌试管，在各试验管内精密加入含试验菌的液体培养基9.0ml，再分别精密加入2个浓度标准品和供试品溶液各1.0ml，立即混匀，按随机区组分配将各管在规定条件下培养至适宜测量的浊度值（通常约为4h）。
（3）空白试验另取2支试管各加入药品稀释剂1.0ml，再分别加入含试验菌的液体培养基9.0ml，其中一支试管立即加入甲醛溶液0.5ml，混匀，作为空白对照，另一支试管同法培养作为细菌生长对照。
（4）吸光度的测量在线测定各管的吸光度，或取出立即加入12%甲醛溶液0.5ml以终止微生物生长，在530nm或580nm波长处测定各管的吸光度。
6、记录与计算
（1）试验记录要求应包括抗生素的品种、剂型、标示量、生产厂、批号、检查目的、检验依据、检验日期、温度、湿度，标准品与供试品的称量、稀释步骤与核对人，抑菌圈测量结果。
（2）标准曲线的的计算标准品的各浓度lg值及相对应的吸光度列成表。
（3）回归系数的显著性测验判断回归得到的方程是否成立，即X、Y是否有直线关系，可采用t检验。
（4）测定结果的计算及可信限率估计。
（5）实验计算所得效价低于估计效价的90%或高于估计效价的110%，则检验结果仅作为初试，应调整供试品估计效价，予以重试。
（6）原料药效价测定一般需双份样品，平行实验以便核对。对不符合规定的样品应至少有2次符合规定的结果，才能发出报告。
（7）效价结果的有效数字按中国药典规定取舍小数位。
7、二剂量法或三剂量法操作步骤除另有规定外，取大小一致的已灭菌的试管，在各品种项下规定的剂量反应线性范围内，选择适宜的高、（中）低浓度，分别精密加入各浓度的标准品和供试品溶液各1.0ml，二剂量的剂距为2：1或4：1，三剂量的剂距为1：0.8。同标准曲线法操作，每一浓度组不少于4个试管，按随机区组分配将各试管在规定条件下培养。照生物检定统计法中的（2.2）和（3.3）法进行可靠性测验及效价计算。
二剂量法或三剂量法同（2.2）和（3.3）法要求直线回归、剂间P<0.01，偏离平行P>0.05。
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