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验证用微生物接种液的制备



录入时间:2008-12-1 16:20:25 来源:青岛银河澳门官网入口

   验证用微生物接种菌液的制备,必须使用5代之内的菌种。取验证(挑战)微生物菌种(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、生孢梭菌;白色念珠菌等的新鲜培养物)至新鲜琼脂培养基中(营养肉汤、硫乙醇酸盐;改良马丁培养基中),30—35℃培养18—524h;20—25℃培养18—24h(白色念珠菌),试管培养物加入0.9%无菌氯化钠溶液约5ml或其他适宜的稀释液,制成浓菌悬液,用上述培养物进行1ml—9ml的10倍系列稀释,按《中国药典》(2005年版)规定的平皿菌落计数法测定菌数,制成每毫升含菌10—100菌落形成单位(CFU)的菌悬液。备用。 
    将黑曲霉菌接种至真菌琼脂斜面培养基上,20—25℃培养5—7d,使大量的孢子产生。加入3—5ml0.9%无菌氯化钠溶液,用玻璃棒将孢子洗脱。然后,用管口带有能过滤菌丝装置(如薄的无菌棉花或纱布的无菌毛细吸管)吸出孢子菌液至无菌试管内,用浊度法或《中国药典》(20058年版)规定的平皿菌落计数法测定菌数,将菌液稀释至每毫升含10—1010个。备用。 
    以上确定供试用的菌液(稀释菌液含10—100CFU/ml)就可作为验证用接种液,接种液要保存在2—8℃的冰箱内,可于1周内使用,但要求在每次接种时须重新计数,以确证稀释菌液的准确浓度。    
   

 

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