(1)芽孢染色法
①准备染液。
②染色。用芽孢菌制成涂片,干燥后加热固定,放一小块滤纸片,之后滴加数滴石炭酸复红液,微加热温染5min,冷却后用流水冲洗,用95%酒精脱色2min,水洗,再滴加碱性美蓝复染0.5min,水洗,吸干后镜检。
结果:菌体呈蓝色,芽孢呈红色。
(2)改良Schaefferr-Fulton染色法
①制备菌悬液。加1—2滴水于小试管中,用接种环挑取2—3环菌苔于试管中,搅拌均匀,制成浓的菌悬液。
②染色。加孔雀绿染液2—3滴于小试管中,并使其与菌液混合均匀,然后将试管置于沸水浴的烧杯中,加热染色10—15min。
③涂片固定。用接种环挑取试管底部菌液数环于洁净载玻片上,涂成薄膜,然后将涂片通过火焰3次温热固定。
④脱色。水洗,直至流出的水无绿色为止。
⑤复染。用石炭酸复红染液染色2—3min,倾去染液并用滤纸吸干残液。
⑥镜检。干燥后用油镜观察。
结果:芽孢呈绿色,菌体为红色。
(3)Schaefferr-Fulton染色法
①制片。按常规涂片、干燥、固定。
②染色。加数滴孔雀绿染液于涂片上,用试管夹夹住载玻片一端,在微火上加热至染料冒蒸汽并开始计时,染5min。
③水洗。待玻片冷却后,用缓流自来水冲洗,直至流出的水无色为止。
④复染。用石炭酸复红染液复染 !%&’。
⑤水洗。用缓流水洗后,吸干。
⑥镜检。干后用油镜观察。
结果:芽孢呈绿色,菌体为红色。
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