银河澳门官网入口,银河集团网址登录

银河澳门官网入口,银河集团网址登录

中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服热线:400-0532-596
微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->微生物基本知识->鞭毛染色法—实验方法

鞭毛染色法—实验方法



录入时间:2008-11-14 15:20:04 来源:青岛银河澳门官网入口

   
(1)改良Ryn鞭毛染色法 
①玻片的处理。要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24h以上,用时从酒精中取出,以干净纱布擦干后使用。 
②在玻片上滴蒸馏水两滴。1张玻片上可同时制2个涂片。 
③用接种环挑取血平板上菌少许,将细菌点在玻片上的蒸馏水滴的顶部,一般只需点一下,只允许极少量的细菌进入水滴,不可搅动,以免鞭毛脱落。 
④玻片置室温自然干燥 。 
⑤滴加染液于玻片上染色。 
⑥约10—15min后,用自来水缓慢冲去染液,冲洗时应避免染液表面的金属光泽膜滞留在玻片上,影响镜检。 
⑦玻片自然干燥后,镜检时应以涂片的边缘开始,逐渐移向中心。原因是边缘细菌较少且相互分开,鞭毛容易观察。细菌密集的地方鞭毛被菌体挡住,不易观察。 
    结果:菌体和鞭毛均染成淡紫色。 
(2)硝酸银染色法 
①活化菌种。冰箱中保存的菌种,通常要连续移种1—2次后,接种于新配制的营养琼脂斜面(表面较湿润、基部有冷凝水),28—32°培养10—14h,取斜面和冷凝水交接处培养物作染色材料;或点种于新制备的营养琼脂(含8—10g/l的琼脂 )平板中央,28—32°培养18—30h,让菌种扩散生长,取菌落边缘的菌苔(不要取菌落 中央的菌苔 )作染色材料。 
②制备菌液。取斜面或平板菌种培养物数环于盛有1—2ml无菌水的试管中,制成轻度浑浊的菌悬液用于制片。也可用培养物直接制片,但效果往往不如先制备菌液好。 
③制片。取一滴菌液于载玻片的一端,然后将玻片倾斜,使菌液缓缓流 向另一端,用吸水纸吸去玻片下端多余菌液,室温(或 162温室)自然干燥 。干后应尽快染色。 
④染色。滴加硝酸银染色A液,染3—5min,用蒸馏水充分洗去A液。用B液冲去残水后,再加B液覆盖涂片染色约数秒至1min,当涂面出现明显褐色时,立即用蒸馏水冲洗。若加B液后显色较慢,可用微火加热,直至显褐色时立即水洗。自然干燥 。 
⑤镜检。用油镜观察。观察时,可从玻片的一端逐渐移至另一端,有时只在涂片的一定部位观察到鞭毛。 
   结果:菌体呈深褐色,鞭毛显褐色。 
(3)改良的Leifson染色法 
①活化菌种同硝酸银染色法。 
②制片。用记号笔在载玻片反面将玻片分成3—4个等分区,在每一小区的一端放一小滴菌液。将玻片倾斜,让菌液流到小区的另一端,用滤纸吸去多余的菌液。室温或37°, 自然干燥 。 
③染色。加Leifson染色液覆盖第一区的涂面,数分钟后,加染液于第二区涂面,如此继续染第三区、第四区。在染色过程中注意观察,当整个玻片都出现铁锈色沉淀、染料表面出现金色膜时,直接用水轻轻冲洗(不要先倾去染料再清洗,否则背景不清 ),染色时间大约10min。 
④镜检。自然干燥后,油镜检查。 
  结果:菌体和鞭毛均呈红色。

 

上一篇:鞭毛染色法

下一篇:芽孢染色法

首页 | 关于我们 | 网上商城 | 在线客服 | shchuhu.com
业务联系电话
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
邮箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青岛市城阳区锦汇路1号A2栋
产品技术咨询
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它时段:13105190021
投诉与建议:13105190021 13006536294