一、器材:
1、菌种
金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的染色标本片。
2、仪器或其他用具
目镜测微尺,镜台测微尺,载玻片,盖玻片,显微镜,擦镜纸等。
二、试验方法
1、校正目镜测微尺
(1)装目镜测微尺:取出目镜,把目镜上的透镜旋下,将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒 内的隔板上,然后旋上目镜透镜,再将目镜插入镜筒内。
(2)校正目镜测微尺把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。先用低倍镜观察,对准焦距,视野中看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。因为镜台测微尺的刻度每格长10um,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的实际长度。
目镜测微尺每格长度=两重合线问镜台测微尺的格数*10 /两重合线间目镜测微尺的格数
例如目镜测微尺5小格正好与镜台测微尺1小格重叠,已知镜台测微尺每小格为10um,则目镜测微尺上每小格长度为1um*10/5=2um。
用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。
由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长发)进行,而且只能在该显微镜上重复使用,当更换不同显微镜目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。
2、测定细菌的大小
移去镜台测微尺,换上细菌染色标本片,先在低倍镜和高倍镜下找到标本后,换油镜测金黄色葡萄球菌的直径和大肠杆菌的长度和宽度。测量时,通过转动目镜测微尺和移动载玻片,测出细菌直径或长和宽所占目镜测微尺的恪数。测出的格数乘上目镜测微尺每格的校正值,即等于该菌的实际大小。一般测量菌的大小要在同一个标本片上测定10—20个菌体,求出平均值,才能代表该菌的大小。
通常测定对数生长期菌体的大小来代表该菌的大小。
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