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微生物鉴别方法—新技术新方法—分子生物学方法2,2



录入时间:2008-11-13 15:48:04 来源:青岛银河澳门官网入口

   
    ②DNA—rRNA分子杂交:DNA中(G+C)mol%测定和DNA—DNA分子杂交方法为微生物种和属的分类鉴定研究开辟了新的途径,解决了以表型特征为依据所无法解决的一些疑难 问题。但是对许多属以上的分类单元的正确关系仍不能解决。因为许多研究表明,当两个菌株的DNA配对碱基少于20%时,DNA—DNA分子杂交往往不能形成双链,因而限制了DNA—DNA分子杂交方法在微生物种 以上单元分类中的应用。要解决这个问题,就要研究RNA的碱基序列,需要用rRNA与DNA进行杂交。RNA是RNA转录的产物。在生物进化过程中,其碱基序列的变化比基因组要慢得多,保守得多,它甚至保留了古老祖先的一些碱基序列。因此,当两个菌株的DNA—DNA杂交率很低或不能杂交时,用DNA—rRNA杂交仍可能出现较高的杂交率,因而可以用来进一步比较关系更远的菌株之间的关系,进行属和属以上等级分类单元的分类 。DNA—rRNA杂交和DNA—DNA杂交的原理和方法基本相同,都是利用核酸复性的规律。但两种方法也有差异:a。在DNA—rRNA分子杂交中,同位素标记部位在rRNA。 
B.DNA—rRNA分子杂交结果是以Tm值来表示。Tm值越高,表示亲缘关系越近。

 

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