一、试验原理及用途
用于单增李斯特氏菌的选择分离培养。
哥伦比亚琼脂基础提供氮源和生长因子等营养物质,内含琼脂为凝固剂;细菌分解七叶苷产生七叶素,七叶素与铁离子结合生成黑色物质,形成黑色菌落;柠檬酸铁铵可提供铁元素;氯化锂维持渗透压;粘菌素、拉氧头孢为抑菌剂。
二、培养基配方(g/L)
哥伦比亚琼脂基础 |
42.5 |
七叶苷 |
1.0 |
柠檬酸铁铵 |
0.5 |
氯化锂 |
15.0 |
粘菌素 |
0.01 |
pH值7.2±0.2(25℃) |
三、试验方法
1、称取本品59.01g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌10分钟,冷至46℃时,加入2mL过滤除菌的1%拉氧头孢溶液,混匀,倾入无菌平皿,备用。
2、接种质控菌株,涂布接种至培养基,胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA,货号:HB0177-8)作为参比培养基。
3、放置35℃±1℃需氧培养24h-48h。
四、质控结果
接种以下质控菌株,放置35℃±1℃需氧培养24h-48h。如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
回收率 |
生长情况 |
其它特征 |
单增李斯特氏菌 |
ATCC 19114 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落,有黑色环 |
英诺克李斯特氏菌 |
ATCC 33090 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落,有黑色环 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
图1 改良牛津琼脂培养基的原理和使用方法
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