一、双歧杆菌属情况简要介绍：

  双歧杆菌（Bifidobacterium）是1899年由法国学者Tissier从母乳营养儿的粪便中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌。双歧杆菌是有益菌的代表，其中的婴儿双歧杆菌（B.infantis）、青春双歧杆菌（B.adolescentis）、长双歧杆菌（B.longum）和短双歧杆菌（B.breve）等已广泛用于药品或含活菌医疗保健品——微生态调节剂的生产上。

  双歧杆菌属于放线菌科，不抗酸、无芽孢，无动力，菌体形态多样，呈短杆状、纤细杆状或球形，可形成各种分支或分叉形态。发酵碳水化合物活跃，发酵产物主要是乙酸和乳酸，二者的摩尔比是3:2，不产生二氧化碳，不产生丁酸和丙酸，触酶阴性。

双歧杆菌的鉴定通常是用双歧杆菌琼脂厌氧培养基进行分离计数，最后进行涂片镜检、生化鉴定及有机酸代谢产物测定。

二、产品用途及原理：

  该培养基用于双歧杆菌的分离培养。

  蛋白胨和酵母浸粉提供微生物生长所需的碳源、氮源、维生素和生长因子；可溶性淀粉可提供碳源；葡萄糖为可发酵糖类；吐温80、肝浸粉、番茄浸粉和L-半胱氨酸为培养各种双歧杆菌提供生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂。

三、培养基配方（g/L）：

四、试验方法：

  1. 称取本品70.0g，再吸取1mL吐温80，加热溶解于1000mL蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min-20min，稍冷后倾入无菌平皿，待凝固后备用。

  2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液，吸取适宜梯度的菌悬液涂布接种于待测培养基和参比培养基；

  3. 放置于恒温培养箱36℃±1℃厌氧培养48h，观察试验结果。

五、试验结果判断：

  接种以下质控菌株，放置36℃±1℃厌氧培养48h，试验结果如图1所示。

图1 双歧杆菌琼脂培养基微生物质控结果

六、注意事项

  婴儿双歧杆菌为厌氧菌，氧气对其有毒害作用，应在厌氧操作箱中操作，若是在正常环境中操作，从厌氧菌暴露在空气中开始到放入厌氧环境中培养结束，整个过程应尽可能快速操作，一般不超过15分钟，暴露时间越长，厌氧菌越容易死亡。

  厌氧菌培养相关信息可参考原创文章：专性厌氧菌的培养方法及注意事项-点击查看。

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