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MR-VP生化鉴定管的原理及使用方法

张立鑫
录入时间:2024-9-13 16:59:52 来源:青岛银河澳门官网入口


一、产品用途及原理

  用途:用于大肠埃希氏菌、O157菌、单增李斯特氏菌、肠杆菌科等的生化鉴定。

  添加剂:每盒需配套1盒甲基红试剂盒HB8280与1盒V-P试剂盒HB8281使用。

  原理:䏡胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖类;磷酸氢二钾是缓冲剂。

MR实验中,不同细菌分解葡萄糖的产物不同,大肠埃希氏菌、单增李斯特氏菌可分解葡萄糖产生大量酸,使pH值下降到4.5以下,滴入甲基红显红色,即为MR阳性;产气肠杆菌产酸较少,滴入甲基红显橙黄色。

V-P实验中产气肠杆菌、单增李特氏菌分解葡萄糖产生丙酮酸,并使丙酮酸脱羧,生成中性的乙酰甲基甲醇,在碱性溶液中被空气氧化生成二乙酰,继续与培养基中的胍基反应生成红色化合物,即为V-P阳性。


二、培养基配方(g/L)

䏡胨

7.0

葡萄糖

5.0

磷酸氢二钾

5.0

pH值6.9±0.2(25℃)


三、试验方法

  1、取适量培养物制备菌悬液,接种于MR-VP生化管中,36℃±1℃培养24h-48h。

  2、甲基红(MR)试验

按照甲基红试剂盒说明书滴加甲基红试剂,立即观察结果。鲜红色为阳性,黄色为阴性。

  3、V-P试验

  按照V-P试剂盒说明书滴加V-P试剂,充分振摇生化管,观察结果。阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36℃±1℃继续培养4h再进行观察。


四、质控结果

  接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃需氧培养24h-48h。结果如图1。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

方法

质控结果

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

>5000

定性

MR:+(变红);VP:-

单增李斯特氏菌

ATCC 19114

>5000

定性

MR:+(变红);VP:+(变红)

普通变形杆菌

ATCC 13355

>5000

定性

MR:+(变红);VP:-

产气肠杆菌

ATCC 13048

>5000

定性

MR:-;VP:+(变红)

大肠埃希氏菌O157

ATCC 35150

>5000

定性

MR:+(变红);VP:-

  培养24h:

  培养32h:

  培养40h:

  培养44h:

  培养48h:

  培养52h:

图1 MR-VP生化鉴定管微生物质控结果

由图1所示,接种质控菌液后培养24h至52h的生化鉴定结果均相同。


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注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。

 

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