一、洋葱伯克霍尔德菌群简介
洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia,BC)原名洋葱假单胞菌,最初是由腐烂的洋葱根茎中分离得到,为革兰氏阴性杆菌,产黄色色素,在TSA上菌落呈黄色,后根据rRNA序列重新分类,归属于新成立单独的霍尔德氏菌属,属内其他种包括唐菖蒲伯克霍尔德氏菌、鼻疽伯克霍尔德氏菌、越南伯克霍尔德氏菌等。
洋葱伯克霍尔德菌群(Burkholderia cepaciacomplex,BCC)是一类生化反应相似的霍尔德氏菌菌群,目前包括20多个种(包括洋葱伯克霍尔德氏菌、多噬伯克霍尔德氏菌、神秘伯克霍尔德氏菌等),9种基因型。由于生化反应特征相似,通常需要用PCR方法进行区分。此菌群具有较强的耐药性,甚至能以部分抗生素做为碳源生长利用,若药品中出现此菌,就会存在可能失效的风险,在USP中规定不得检出,而中国国家药典委员会也在2022年公布了BCC检查法草案的公示稿。
二、活化方法
培养基的选择:可选择TSA/TSB、NA/NB、BHI等培养基进行活化。
操作方法:若菌种为冻干粉形式,按照说明书溶解后,可直接涂布或划线至琼脂平板上,也可加入至液体培养基中;若菌种为甘油冻存管形式,从冰箱中取出速融后,涂布或划线至平板上,也可加入至液体培养基中。
注:此菌活化后在平板上存活时间不长,制作菌悬液应使用新鲜活化的培养物(2-3天的培养物)。
三、实验室常用保存方法
此菌在室温下易死亡,在-20℃也不易长期保存,因此建议在-70℃以下的条件超低温冷冻保存,可使用甘油冻存法、瓷珠保存法、脱脂牛奶保存法等方法,可保存两年以上没有问题。
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