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CCFA琼脂培养基的原理及使用方法

李令梅
录入时间:2024-4-15 11:21:55 来源:青岛银河澳门官网入口

一、培养基用途:

  用于艰难梭菌的选择性分离培养。


二、培养基成分及使用方法:

  1.培养基成分

成分

含量(g/L)

胰蛋白胨

10.0

牛肉浸粉

10.0

酵母粉

3.0

葡萄糖

1.0

可溶性淀粉

1.0

氯化钠

5.0

碳酸氢钠

0.4

L-半胱氨酸盐酸盐

0.5

丙酮酸钠

1.0

L-精氨酸

1.0

焦磷酸盐

0.25

果糖

6.0

琥珀酸

0.5

氯化血红素

0.01

中性红

0.03

琼脂

13.2

pH 7.2±0.2 25℃


  2.使用方法

  称取本品 53.20g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200mL。121℃高压灭菌15min,冷却至45-50℃时,每200mL培养基加入50%卵黄乳液10mL、无菌环丝氨酸0.1g和无菌头孢西丁3.2mg。混匀,倾入无菌平皿,备用。


三、 原理:

  蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖可溶性淀粉、L-半胱氨酸盐酸盐、L-精氨酸、焦磷酸盐、氯化血红素、琥珀酸、丙酮酸钠提供碳源、氮源、维生素和生长因子;果糖为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;中性红是酸碱指示剂,酸性条件变黄;琼脂是培养基凝固剂;环丝氨酸和头孢西丁可抑制杂菌和其他梭菌;50%卵黄乳液可检验是否产脂酶,艰难梭菌不产生脂酶故无沉淀环。


四、实验结果:

  1.按使用方法制备培养基,接种以下质控菌株,放置35℃厌氧培养48小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

其他特征

艰难梭菌

ATCC43593

/

生长良好

黄色菌落,无沉淀环

产气荚膜梭菌

ATCC13124

/

抑制

/

  2.艰难梭菌在培养基上的生长情况如下图所示:

   图1-1  CCFA琼脂培养基微生物质控结果


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注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。


 

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