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3%NaCl精氨酸双水解酶生化管原理及使用方法

李令梅
录入时间:2024-3-22 14:37:34 来源:青岛银河澳门官网入口

一、产品用途及原理:

  用于副溶血性弧菌生化鉴定。

  某些细菌可产生精氨酸脱羧酶,使精氨酸脱去羧基,生成精胺,从而使培养基变碱性并通过指示剂变色来观察。脱羧酶是适应酶或称诱导酶,对底物有特异性,在无相对氨基酸的培养基中不产生此酶,并且需要酸性环境和适宜温度。故在培养基中加入葡萄糖,使细菌发酵葡萄糖产酸,以利于脱羧酶的产生。氨基酸的分解是在厌氧条件下进行,故在培养基表面加液体石蜡。由于细菌发酵葡萄糖产酸,在培养初期培养基和对照培养基呈黄色,继续培养时,若氨基酸经脱羧或水解产生胺类则培养基变碱,呈紫色或紫红色,即为阳性反应;如至培养末期培养基如同对照管一样均呈黄色,则判为阴性反应。


二、培养基配方(g/L):

酵母浸粉

3.0

L-精氨酸

5.0

葡萄糖

1.0

溴甲酚紫

0.016

氯化钠

30.0

pH 6.7±0.1   25℃


三、试验方法:

  1.用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈,掰开待用;

  2.将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制备成5 McFarland浊度(约109CFU/ml)的菌悬液;

  3.吸取0.05ml-0.08ml(约1-2滴)菌悬液至鸟氨酸脱羧酶生化管和氨基酸脱羧酶试验对照生化管,36±1℃培养24±2h后,观察试验结果。


四、结果观察与解释                                        

  接种以下质控菌株,放置36±1℃培养24±2h小时:

质控菌株

菌株编号

生长情况

其他特征

副溶血性弧菌

ATCC17802

+++

阴性,黄色

普通变形杆菌

ATCC13315

+++

阴性,黄色

溶藻弧菌

ATCC17749

+++

阴性,黄色

阪崎肠杆菌

ATCC29004

+++

阳性,紫色

创伤弧菌

ATCC27562

+++

阴性,黄色


图1-1  3%NaCl精氨酸双水解酶生化管质控结果

备注:a:副溶血性弧菌,b:普通变形杆菌,c:溶藻弧菌,d:阪崎肠杆菌,e:创伤弧菌,f:空白对照


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