一、产品用途与试验原理：
用于艰难梭菌选择性分离培养。
蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、和生长因子;葡萄糖、果糖、可溶性淀粉提供碳源;碳酸氢钠为酸碱缓冲剂;丙酮酸钠和琥珀酸促进艰难梭菌的生长;L-精氨酸可以降低代谢产物对生长的抑制作用；L-半胱氨酸盐酸盐可以维持平皿的厌氧环境；焦磷酸盐和氯化血红素可以提供无机盐离子；氯化钠维持渗透压；中性红为酸碱指示剂；琼脂是培养基的凝固剂；D-环丝氨酸和头孢西丁为抑菌剂，头孢西丁对除产气荚膜梭菌外的梭菌几乎无抑菌性；艰难梭菌不产生磷脂酶，卵黄乳液中含有卵磷脂，艰难梭菌不会产生沉淀环，以此区别目标菌与非目标菌。
二、培养基配方（g/L）：
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胰蛋白胨 |
10.0 |
|
牛肉浸粉 |
10.0 |
|
酵母浸粉 |
3.0 |
|
葡萄糖 |
1.0 |
|
可溶性淀粉 |
1.0 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
碳酸氢钠 |
0.4 |
|
丙酮酸钠 |
1.0 |
|
L-半胱氨酸盐酸盐 |
0.5 |
|
L-精氨酸 |
1.0 |
|
焦磷酸盐 |
0.25 |
|
果糖 |
6.0 |
|
琥珀酸 |
0.5 |
|
氯化血红素 |
0.01 |
|
中性红 |
0.03 |
|
琼脂 |
13.5 |
|
pH7.0-7.4 25℃ |
|
三、试验方法：
粉体装培养基的使用：
1、称取本品53.20g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中完全溶解，每瓶200ml，121℃灭菌15min，冷至 45-50℃时,每200ml培养基中加入50%卵黄乳液10ml，无菌环丝氨酸0.1g和无菌头孢西丁3.2mg，混匀，倾入无菌平皿,备用。
2、准备质控菌液。接种准备好的平皿。
3、放置35℃厌氧培养48小时，记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株，放置35℃厌氧培养48小时，记录实验结果。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长特征 |
其他特征 |
|
艰难梭菌 |
ATCC43593 |
/ |
生长良好 |
黄色菌落，无沉淀环 |
|
产气荚膜梭菌 |
ATCC13124 |
/ |
抑制 |
/ |
艰难梭菌ATCC43593，黄色菌落，无沉淀环
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