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    CCDA琼脂培养基的原理及使用方法

    林娇娇
    录入时间:2024-1-23 9:18:23 来源:青岛银河澳门官网入口

    一、产品用途及原理

      用途:本培养基用于空肠弯曲菌的分离培养。

      添加剂:每瓶需配套添加6盒HB0274a CCDA添加剂使用,每支CCDA添加剂添加于200mL CCDA琼脂中。每支添加剂中含两性霉素B、头孢哌酮和利福平。

      原理:蛋白胨、牛肉浸出粉、酸水解酪蛋白为微生物的生长提供碳源、氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;活性炭具有吸附作用,可吸收培养基中的有害物质;去氧胆酸钠为选择性抑菌剂,可抑制革兰氏阳性菌的生长;丙酮酸钠和硫酸亚铁有利于空肠弯曲菌的生长;头孢哌酮可抑制普通肠道菌的生长,两性霉素B可抑制真菌的生长,利福平可抑制非弯曲菌的其他厌氧菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂。


    二、培养基配方(g/L)

    蛋白胨

    10.0

    牛肉浸出粉

    10.0

    酸水解酪蛋白

    3.0

    氯化钠

    5.0

    活性炭

    4.0

    去氧胆酸钠

    1.0

    丙酮酸钠

    0.25

    硫酸亚铁

    0.25

    琼脂

    18.0

    pH值7.4±0.2(25℃)


    三、试验方法

      1、称取本品51.5g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装于锥形瓶中,每瓶200mL,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶中加入1支CCDA琼脂培养基添加剂,混匀后倾入无菌平皿中。

      2、制备质控菌液接种到培养基上。

      3、放置于42℃±1℃微需氧培养24h-48h。可使用HBYY008 2.5L微需氧产气包构造微需氧环境。


    四、结果观察

      接种以下质控菌株,放置于42℃±1℃微需氧培养24h-48h。培养结果如图1。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量

    (CFU)

    回收率

    生长情况

    其它特征

    空肠弯曲菌

    CICC 22936

    10-100

    ≥50%

    +++

    菌落有光泽、潮湿、扁平,

    呈扩散生长倾向

    大肠埃希氏菌

    ATCC 25922

    100-1000

    /

    -

    抑制

    金黄色葡萄球菌

    ATCC 25923

    100-1000

    /

    -

    抑制


    图1 CCDA琼脂培养基的微生物质控结果


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