一、产品用途及原理
用途:本培养基用于蜡样芽孢杆菌的溶菌酶试验。
添加剂:每瓶需配套添加HB8699a 0.1%溶菌酶溶液使用,每支添加于99mL溶菌酶肉汤基础中。
原理:牛肉浸粉、蛋白胨为微生物的生长提供碳氮源、维生素和生长因子。溶菌酶可水解细菌的细胞壁,主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。
二、培养基配方(g/L)
牛肉浸粉 |
3.0 |
蛋白胨 |
5.0 |
pH值6.8±0.1(25℃) |
三、试验方法
1、称取本品8.0g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,分装于锥形瓶中,每瓶99mL,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1mL,混匀后分装无菌试管,备用。
2、制备质控菌液接种到培养基中。
3、放置于36℃±1℃厌氧培养24h-48h。
四、结果观察
接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃厌氧培养24h-48h。培养结果如图1。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其它特征 |
蜡样芽孢杆菌 |
ATCC 11778 |
>5000 |
+++ |
浑浊 |
蜡样芽孢杆菌 |
CMCC(B) 63303 |
>5000 |
+++ |
浑浊 |
枯草芽孢杆菌 |
CMCC(B) 63501 |
>5000 |
- |
抑制 |
图1 溶菌酶肉汤基础培养基的微生物质控结果
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