一、产品原理及介绍
沙门氏菌属肠杆菌科,革兰氏阴性肠道杆菌。菌体大小(0.6~0.9)×(1~3)微米无芽胞,一般无荚膜,除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外,大多有周身鞭毛;不液化明胶,不分解尿素,不产生吲哚,不发酵乳糖和蔗糖,能发酵葡萄糖、甘露醇、麦芽糖和卫芽糖,大多产酸产气,少数只产酸不产气。
培养基用途:用于饲料中沙门氏菌分离培养。
原理:蛋白胨、酵母浸粉和牛肉浸粉作为营养物质提供菌体细胞生长所需要的氮源、维生素、氨基酸及生长因子等;磷酸盐为菌体生长提供相对稳定的酸碱缓冲体系;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;酚红指示剂在pH值为6.8时呈黄色,8.1时呈粉红色,发酵糖产酸的菌落呈黄色,不发酵糖的菌落为红色;煌绿抑制革兰氏阳性菌和大多数非沙门氏菌的革兰氏阴性杆菌,通常抑制发酵乳糖、蔗糖的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L)
蛋白胨 |
10.0 |
酵母浸粉 |
3.0 |
牛肉浸粉 |
5.0 |
磷酸氢二钠 |
1.0 |
磷酸二氢钠 |
0.6 |
乳糖 |
10.0 |
蔗糖 |
10.0 |
酚红 |
0.09 |
煌绿 |
0.0125 |
琼脂 |
15.0 |
pH值7.0±0.1(25℃) |
三、试验方法
1、称取本品54.7g,加热搅拌煮沸,完全溶解于1000mL蒸馏水中,冷却至50℃-55℃左右时,倾入无菌平皿备用。无需高压灭菌,当天制备当天使用。
2、制备质控菌液接种于培养基上。
3、放置于36℃±1℃需氧培养20h-24h,观察试验结果。
四、质控结果
接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃需氧培养20h-24h。结果如图1。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
≥50% |
+++ |
红色菌落 |
肠炎沙门氏菌 |
CMCC(B) 50760 |
10-100 |
≥50% |
+++ |
红色菌落 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
福氏志贺氏菌 |
ATCC 13124 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
|
|
鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028 |
肠炎沙门氏菌CMCC 50760 |
|
|
大肠埃希氏菌ATCC 25922 |
金黄色葡萄球菌ATCC 2592 |
|
|
福氏志贺氏菌ATCC 13124 |
图1 酚红煌绿琼脂培养基微生物质控结果
五、注意事项
1、该培养基在进行煮沸加热灭菌时,沸腾后易有橙红色泡沫溢出,应注意在沸腾后关注液面上升速度。
2、该培养基倒板冷却后平板整体呈橘红色,在接菌试验完毕进行菌落计数时,可能不易辨别红色菌落,可使用灯检箱或打辅助光等方式进行计数。
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