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酚红煌绿琼脂培养基的补充介绍及注意事项

张立鑫
录入时间:2023-11-3 13:57:35 来源:青岛银河澳门官网入口

一、产品原理及介绍

  沙门氏菌属肠杆菌科,革兰氏阴性肠道杆菌。菌体大小(0.6~0.9)×(1~3)微米无芽胞,一般无荚膜,除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外,大多有周身鞭毛;不液化明胶,不分解尿素,不产生吲哚,不发酵乳糖和蔗糖,能发酵葡萄糖、甘露醇、麦芽糖和卫芽糖,大多产酸产气,少数只产酸不产气。

  培养基用途:用于饲料中沙门氏菌分离培养。

  原理:蛋白胨、酵母浸粉和牛肉浸粉作为营养物质提供菌体细胞生长所需要的氮源、维生素、氨基酸及生长因子等;磷酸盐为菌体生长提供相对稳定的酸碱缓冲体系;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;酚红指示剂在pH值为6.8时呈黄色,8.1时呈粉红色,发酵糖产酸的菌落呈黄色,不发酵糖的菌落为红色;煌绿抑制革兰氏阳性菌和大多数非沙门氏菌的革兰氏阴性杆菌,通常抑制发酵乳糖、蔗糖的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。


二、培养基配方(g/L)

蛋白胨

10.0

酵母浸粉

3.0

牛肉浸粉

5.0

磷酸氢二钠

1.0

磷酸二氢钠

0.6

乳糖

10.0

蔗糖

10.0

酚红

0.09

煌绿

0.0125

琼脂

15.0

pH值7.0±0.1(25℃)


三、试验方法

  1、称取本品54.7g,加热搅拌煮沸,完全溶解于1000mL蒸馏水中,冷却至50℃-55℃左右时,倾入无菌平皿备用。无需高压灭菌,当天制备当天使用。

  2、制备质控菌液接种于培养基上。

  3、放置于36℃±1℃需氧培养20h-24h,观察试验结果。


四、质控结果

  接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃需氧培养20h-24h。结果如图1。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

回收率

生长情况

其他特征

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

10-100

≥50%

+++

红色菌落

肠炎沙门氏菌

CMCC(B) 50760

10-100

≥50%

+++

红色菌落

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

100-1000

/

-

抑制

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

100-1000

/

-

抑制

福氏志贺氏菌

ATCC 13124

100-1000

/

-

抑制




鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028
肠炎沙门氏菌CMCC 50760


大肠埃希氏菌ATCC 25922
金黄色葡萄球菌ATCC 2592

福氏志贺氏菌ATCC 13124

图1 酚红煌绿琼脂培养基微生物质控结果


五、注意事项

  1、该培养基在进行煮沸加热灭菌时,沸腾后易有橙红色泡沫溢出,应注意在沸腾后关注液面上升速度。

  2、该培养基倒板冷却后平板整体呈橘红色,在接菌试验完毕进行菌落计数时,可能不易辨别红色菌落,可使用灯检箱或打辅助光等方式进行计数。


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注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。

 

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