银河澳门官网入口,银河集团网址登录

银河澳门官网入口,银河集团网址登录

中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服热线:400-0532-596
微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->微生物基本知识->目的基因的高效分泌型表达

目的基因的高效分泌型表达



录入时间:2023-10-27 14:46:50 来源:青岛银河澳门官网入口

大肠杆菌是最常用的宿主细胞,但大肠杆菌没有能力将所表达的蛋白质产物分泌到胞外,一般在胞内形成包含体。包含体的分离需要细胞破碎,而且包含体不溶于水,也没有生物活性。一般需要重新溶解并折叠复性后才具有生物活性。这一过程时间很长而且活性收率往往很低。为了克服这一缺点,如果在质粒设计时就加上一段信号肽基因,就有可能实现目标蛋白质的分泌型表达。目的基因的分泌型表达有两种情形:目标蛋白分泌到细胞周质中或目标蛋白转运到细胞周质后,再分泌到细胞外。

常用的大肠杆菌信号肽有PhoA,LamB,OmpA和STII的导肽。通过与这些导肽的融合,已经有多种蛋白质实现了分泌型表达,如:人生长激素,人干扰素,人表皮生长因子,牛生长因子等。但是,目标蛋白与信号肽的融合并不能保证产物一定会分泌到胞外,分泌到细胞周质中的目标蛋白也不一定是可溶的。通过添加非代谢性糖和降低表达速率能增加其溶解性。对于以大肠杆菌作为宿主细胞的表达系统而言,要顺利实现分泌型表达还有许多问题有待于解决。

另一类分泌型表达系统则从破坏细胞壁的结构着手。例如:将目标蛋白和细胞壁裂解酶基因同时转化到宿主细胞中,在细菌生长到一定阶段后加入诱导剂后,在目标蛋白质开始表达的同时,细胞壁裂解酶也开始表达并破坏细胞壁的结构,使表达的目标蛋白质释放到胞外。这种方法已经在基因工程菌生产聚羟基烷酸时取得成功。

 

上一篇:质粒设计对目的基因表达的影响

下一篇:重组细胞培养基设计和培养条件优化

首页 | 关于我们 | 网上商城 | 在线客服 | shchuhu.com
业务联系电话
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
邮箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青岛市城阳区锦汇路1号A2栋
产品技术咨询
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它时段:13105190021
投诉与建议:13105190021 13006536294