







一、用途:
用于饲料中沙门氏菌分离培养。
	
二、实验原理:
蛋白胨、酵母浸粉,牛肉浸粉提供氮源、维生素和矿物质;磷酸氢二钠和磷酸二氢钠维持均衡的渗透压;乳糖和蔗糖提供碳源;煌绿抑制革兰氏阳性菌和除了沙门氏菌外的大部分革兰氏阴性菌;酚红是pH指示剂;琼脂是凝固剂。
	
三、培养基成分(g/L):
| 
					 蛋白胨  | 
				
					 10.0  | 
			
| 
					 酵母浸粉  | 
				
					 3.0  | 
			
| 
					 牛肉浸粉  | 
				
					 5.0  | 
			
| 
					 磷酸氢二钠  | 
				
					 1.0  | 
			
| 
					 磷酸二氢钠  | 
				
					 0.60  | 
			
| 
					 乳糖  | 
				
					 10.0  | 
			
| 
					 蔗糖  | 
				
					 10.0  | 
			
| 
					 酚红  | 
				
					 0.09  | 
			
| 
					 煌绿  | 
				
					 0.0125  | 
			
| 
					 琼脂  | 
				
					 15.0  | 
			
| 
					 pH 7.0±0.1 25℃  | 
			|
	
四、试验方法:
1、称取本品54.7g,加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中,冷却至50-55℃左右时,倾入无菌平皿,备用。无需高压灭菌,当天制备当天使用。
2、制备质控菌液。
3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板以及参比平板上,每一稀释度接种两个平板。
4、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。
5、36±1℃倒置培养基培养18-24小时,记录实验结果。
	
五、酚红煌绿微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24小时。
| 
					 质控菌株  | 
				
					 菌株编号  | 
				
					 接种量(CFU)  | 
				
					 参比或计 数培养基  | 
				
					 方法  | 
				
					 质控评定标准  | 
				
					 其他特征  | 
			
| 
					 金黄色葡萄球菌  | 
				
					 ATCC25923  | 
				
					 /  | 
				
					 /  | 
				
					 半定量  | 
				
					 G≤1  | 
				
					 /  | 
			
| 
					 大肠埃希氏菌  | 
				
					 ATCC25922  | 
				
					 /  | 
				
					 /  | 
				
					 G≤1  | 
				
					 /  | 
			|
| 
					 福氏志贺氏菌  | 
				
					 ATCC13124  | 
				
					 /  | 
				
					 /  | 
				
					 G≤1  | 
				
					 /  | 
			|
| 
					 伤寒沙门氏菌  | 
				
					 ATCC14028  | 
				
					 20-200  | 
				
					 TSA  | 
				
					 定量  | 
				
					 PR≥0.7  | 
				
					 粉白色菌落,菌落 周围稍变红  | 
			
| 
					 鼠伤寒沙门氏菌  | 
				
					 CMCC(B)50115  | 
				
					 20-200  | 
				
					 PR≥0.7  | 
				
					 粉白色菌落,菌落 周围稍变红  | 
			
	
	
图1-2 酚红煌绿琼脂微生物质控结果
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