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酚红煌绿琼脂的使用方法与原理

纪英姿
录入时间:2023-9-22 15:03:36 来源:青岛银河澳门官网入口

一、用途:

  用于饲料中沙门氏菌分离培养。


二、实验原理:

  蛋白胨、酵母浸粉,牛肉浸粉提供氮源、维生素和矿物质;磷酸氢二钠和磷酸二氢钠维持均衡的渗透压;乳糖和蔗糖提供碳源;煌绿抑制革兰氏阳性菌和除了沙门氏菌外的大部分革兰氏阴性菌;酚红是pH指示剂;琼脂是凝固剂。


三、培养基成分(g/L):

蛋白胨

10.0

酵母浸粉

3.0

牛肉浸粉

5.0

磷酸氢二钠

1.0

磷酸二氢钠

0.60

乳糖

10.0

蔗糖

10.0

酚红

0.09

煌绿

0.0125

琼脂

15.0

pH 7.0±0.1 25℃


四、试验方法:

  1、称取本品54.7g,加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中,冷却至50-55℃左右时,倾入无菌平皿,备用。无需高压灭菌,当天制备当天使用。

  2、制备质控菌液。

  3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于待测平板以及参比平板上,每一稀释度接种两个平板。

  4、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。

  5、36±1℃倒置培养基培养18-24小时,记录实验结果。


五、酚红煌绿微生物灵敏度试验:

  按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24小时。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计

数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

/

/

半定量

G≤1

/

大肠埃希氏菌

ATCC25922

/

/

G≤1

/

福氏志贺氏菌

ATCC13124

/

/

G≤1

/

伤寒沙门氏菌

ATCC14028

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

粉白色菌落,菌落

周围稍变红

鼠伤寒沙门氏菌

CMCC(B)50115

20-200

PR≥0.7

粉白色菌落,菌落

周围稍变红


图1-2 酚红煌绿琼脂微生物质控结果

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注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。

 

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