提取方法
①谷类、豆类及种子类
将样品粉碎,通过420μm的标准网筛后,称取其10.0g,加入20mL水,放置2小时。
加入100mL丙酮,搅拌3分钟后,用涂布1cm厚硅藻土的滤纸,抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物,加入50mL丙酮,搅拌3分钟后,按上述同样操作,合并滤液于减压浓缩器中,40℃以下浓缩至约30mL。
将其移入预先注入100mL 10%氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶,合并洗涤液于上述分液漏斗中。 用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL正己烷,按上述同样操作,合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠,不时振荡、混合,放置15分钟后,滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶,以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物,重复操作二次,合并两洗涤液于减压浓缩器中,40℃以下除去正己烷。
残留物中加入30mL正己烷溶解,移入100mL分液漏斗。加入30mL正己烷饱和乙腈, 用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,乙腈层移入磨口减压浓缩器中。正己烷层中加入30mL正己烷饱和乙腈,按上述同样操作,重复二次,合并乙腈层于减压浓缩器中,40℃以下除去乙腈。残留物中加入5mL正己烷溶解。
②水果、蔬菜和末茶
水果和蔬菜:准确称取约1kg试样,必要时定量加入适量的水,搅拌混合均匀后,称取相当于20.0g样品的量。
末茶:称取其5.00g样品,加入20mL水,放置2小时。
加入100mL丙酮, 搅拌3分钟后,用涂布1cm厚硅藻土的滤纸,抽滤于磨口减压浓缩器。取出滤纸上的残留物,加入50mL丙酮,搅拌3分钟后,按上述同样操作,合并滤液于减压浓缩器中,40℃以下浓缩至约30mL。
将其移入预先注入100mL 10%氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶,合并洗涤液于上述分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL正己烷,按上述同样操作,合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠,不时振荡、混合,放置15分钟后,滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶,以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物,重复操作二次,合并两洗涤液于减压浓缩器中,40℃以下除去正己烷。残留物中加入5mL正己烷溶解。
③ 末茶以外的茶
将9.00g样品浸泡于540mL 100℃的水中,室温下放置5分钟后,过滤,移取360mL冷却后的滤液于500mL三角瓶中。加入100mL丙酮和2mL饱和乙酸铅溶液,室温下放置1小时后,用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤,滤液移入1000mL分液漏斗中。再用50mL丙酮洗涤滤纸上的残留物,合并洗涤液于上述分液漏斗中。
在分液漏斗中加入100g氯化钠和100mL正己烷,用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入100mL正己烷,按上述同样操作,合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠,不时振荡、混合,放置15分钟后,滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶,以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物,重复操作二次,合并两洗涤液于减压浓缩器中,40℃以下除去正己烷,残留物中加入5mL正己烷溶解。
b 净化方法
在内径15mm,长300mm的色谱管中注入10g悬浮在正己烷中的柱色谱用合成硅酸镁,其上面再装入约5g无水硫酸钠,放出正己烷至柱上端留有少量正己烷。柱中注入a 提取方法所得的溶液后,注入100mL丙酮:正己烷(1∶19)混合溶液,弃去流出液。再注入100mL丙酮:正己烷(3∶7)混合溶液,收集流出液于磨口减压浓缩器中,40℃以下除去丙酮和正己烷。残留物中加入丙酮溶解,准确至4mL,此为试验溶液。
5.操作方法
a 定性试验
按下列操作条件进行试验,试验结果必须与标准品的一致。
操作条件
柱:内径0.25mm、长30m的石英毛细管,涂布0.25μm厚气相色谱用甲基硅酮,老化。
柱温:在100℃保持1分钟,此后每分钟升温30℃。达到250℃后,每分钟升温6℃,达到300℃后保持2分钟。
进样器温度:250℃ 。
进样方式: 不分流。
检测器温度:280℃ 。
气体流量:以氦气为载气,调整流速使苯唑酮约12分钟流出。调节空气和氢气的流量至适当条件。
b 定量试验
根据与a 定性试验相同试验条件所得的试验结果,峰高法或峰面积法定量。
c 确证试验
按照与a 定性试验相同的试验条件,用气相色谱--质谱仪测定。试验结果必须与标准品的一致。此外,必要时用峰高法或峰面积法定量。
7.定量限
苯唑酮:0.01 mg/kg
苯丙甲环唑:0.01 mg/kg(末茶:0.05 mg/kg)
环丙唑醇:0.005 mg/kg
西草净:0.01 mg/kg
噻呋灭:0.01 mg/kg
四克利:0.02 mg/kg
戊唑醇:0.005 mg/kg
三唑醇:0.01 mg/kg
咯菌睛:谷类和豆类为0.01 mg/kg,水果和蔬菜为0.005 mg/kg
丙环唑:0.01 mg/kg
六那唑:0.01 mg/kg
戊菌唑:0.01 mg/kg
8.注意事项
对于苯丙甲环唑和环丙唑醇,在定性、定量和确证中因检出各2个峰,必须将两个峰面积合并计算,绘制成标准曲线。
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