一、用途：
用于蜂蜜中嗜渗酵母菌计数。
添加剂：每瓶需配套添加8盒HB0296-1a氯霉素溶液使用，每支添加于200ml氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂中。
二、实验原理：
酪蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质；磷酸二氢钾为缓冲剂；硫酸镁提供必需的微量元素；葡萄糖提供碳源；氯霉素抑制细菌的生长；琼脂是培养基的凝固剂；氯硝胺可抑制霉菌菌落蔓延生长；甘油维持一个较低的渗透压。
三、培养基成分（g/L）：
|
酪蛋白胨 |
5.0 |
|
葡萄糖 |
10.0 |
|
磷酸二氢钾 |
1.0 |
|
硫酸镁 |
0.5 |
|
氯硝铵 |
0.002 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH 5.6±0.2 25℃ |
|
四、试验方法：
称取本品31.5g,另取无水甘油200g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每200ml培养基中加入1支氯霉素溶液(20mg),混匀,倾入无菌平皿,备用。
五、氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置25±1℃需氧培养48-168h。
注：回收率计算时，用PDA琼脂做对照培养基。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
|
酵母菌 |
ATCC18790 |
10-100 |
PDA |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
|
白色念珠菌 |
ATCC10231 |
10-100 |
PDA |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
100-1000 |
PDA |
/ |
- |
/ |
不同细菌在氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂上的生长特征：
a：白色念珠菌
b：酵母菌
c：大肠杆菌
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