一、用途及试验原理:
该培养基用于化妆品中霉菌总数测定。
胰蛋白胨、䏡蛋白胨和酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖类;磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为培养基pH缓冲剂;氯化铵、硫酸镁和碳酸钠提供微生物生长所需的离子;氯霉素可抑制细菌的生长;吐温80可中和防腐剂,同时可起到分散作用;琼脂为培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
胰蛋白胨 |
2.5 |
䏡蛋白胨 |
2.5 |
酵母浸粉 |
5.0 |
葡萄糖 |
20.0 |
磷酸氢二钠 |
3.5 |
磷酸二氢钾 |
3.4 |
氯化铵 |
1.4 |
硫酸镁 |
0.06 |
氯霉素 |
0.1 |
碳酸钠 |
1.0 |
琼脂 |
15.0 |
pH值7.0±0.2(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品54.5g,另称取吐温80 20mL,加热溶解于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,混匀,倾入无菌平皿。
2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液。
3. 吸取质控菌液涂布接种于待测培养基和沙氏葡萄糖琼脂上。
4. 放置于28℃±1℃需氧培养72h±2h,观察试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置于28℃±1℃需氧培养72h±2h,试验结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 (CFU) |
参比或计 数培养基 |
方法 |
质控结果 |
其他特征 |
白色念珠菌 |
ATCC 10231 |
20-200 |
沙氏葡萄糖琼脂 |
定量 |
PR≥0.7 |
白色突起菌落 |
酵母菌 |
ATCC 18790 |
20-200 |
沙氏葡萄糖琼脂 |
定量 |
PR≥0.7 |
白色突起菌落 |
黑曲霉 |
ATCC 16404 |
20-200 |
沙氏葡萄糖琼脂 |
定量 |
PR≥0.7 |
有黑色孢子 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
图1 HC琼脂微生物质控结果
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