一、用途及试验原理
本培养基用于假单胞菌增菌培养。
蛋白胨、酪蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;甘油提供碳源;氯化镁和硫酸钾可以刺激绿脓菌素的产生;Irgasan(二氯苯氧氯酚)为高效广谱抗菌剂,对一些革兰氏阳性菌、阴性菌及酵母、病毒均有杀灭和抑制作用。
二、培养基配方(g/L)
蛋白胨 |
10.0 |
酪蛋白胨 |
10.0 |
氯化镁 |
1.4 |
硫酸钾 |
10.0 |
Irgasan |
0.025 |
pH 7.0±0.2(25℃) |
三、试验方法
1、称取本品31.5g并吸取20 mL甘油,加热溶解于980mL蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟备用。
2、制备菌种悬液,接种至假单胞分离肉汤中。
3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养18h-24h。
四、质控结果
接种以下质控菌株,放置36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养18h-24h。菌株培养结果见图1。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
铜绿假单胞菌 |
ATCC 27853 |
10-100 |
+++ |
浑浊 |
铜绿假单胞菌 |
ATCC 9027 |
10-100 |
+++ |
浑浊 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
- |
抑制 |
图1 假单胞分离肉汤的微生物质控结果
五、注意事项
1、培养基中含少量氯化镁,灭菌后可能出现微量沉淀。
2、培养基配制时需要额外添加甘油,甘油质地粘稠要使用合适的量器吸取,以免造成添加量不准,可采取裁剪移液器吸头尖使其口径扩大的方式进行吸取,操作注意平稳缓慢。
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