一、产品用途与试验原理:
本产品用于大肠埃希氏菌选择性增菌培养
明胶胰酶水解物提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;牛胆盐可抑制革兰氏阳性细菌的生长;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫是pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色。
二、培养基配方(g/L):
明胶胰酶水解物 |
20.0 |
乳糖 |
10.0 |
牛胆盐 |
5.0 |
溴甲酚紫 |
0.01 |
pH 7.3±0.2 25℃ |
三、试验方法:
粉体装培养基的使用:
1、称取本品 35.0g,加热搅拌 溶解于 1000ml 纯化水中,分装试管,并在每个试管中加入一个小倒管,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
2、准备质控菌液。
3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液,接种量应小于100CFU,每个梯度接种两个平行试管。
4、放置42-44℃需氧培养24-48小时,记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,放置42-44℃需氧培养24-48小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长特征 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
CMCC(B)44102 |
10-100 |
生长良好 |
产酸产气 |
乙型副伤寒沙门菌 |
CMCC(B)50094 |
10-100 |
生长良好 |
浑浊不产酸不产气 |
金黄色葡萄球菌 |
CMCC(B)26003 |
100-100 |
不生长 |
抑制 |
|
|
|
|
大肠埃希氏菌 ATCC25922 |
金黄色葡萄球菌 CMCC26003 |
乙型副伤寒沙门菌 CMCC50094 |
空白对照 |
五、注意事项
应注意检验促生长能力时,培养的目标菌应在所需最短时间内生长(24小时)抑制菌则应在最长时间内不生长(48小时)
能发酵乳糖产酸且不被胆盐抑制的细菌在本培养基呈现黄色,能发酵乳糖产酸产气且不被胆盐抑制的细菌在本培养基呈黄色且小倒管内有气泡。不能发酵乳糖产酸且不被胆盐抑制的细菌在本培养基呈紫色且液体浑浊。被胆盐抑制生长的细菌在本培养基不生长,表现为紫色澄清液体。
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