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微生物限度培养基适用性常见问题解决



录入时间:2023-6-5 10:16:33 来源:微信公众号微生物菌种网

1、在微生物实验室进行平板类培养基适用性的时候,可能会遇到以下常见的情况,造成试验失败。

  1)培养基平皿表面水珠凝聚,造成涂布培养后菌落蔓延无法计数。

  2)培养后计数结果超标。

  3)培养后没有逐日观察,造成菌落生长成团,无法计数或计数结果统计错误。


2、原因分析及解决措施

情况①:培养基平皿表面水珠凝聚的原因在于浇碟的时候,培养基温度高,在平皿表面会形成水珠。

  解决措施:培养基平皿表面水珠凝聚

  ◆培养基制备

  培养基制备的一般流程:

  ①上午10点开始用干粉培养基天平称重,11点20开始灭菌,13:00开锅,在灭菌锅中冷却至13:30。

  ②将对照培养基置于50℃水浴锅中待用。

  知识点:灭菌锅灭菌结束时,需要及时开锅,避免培养基长时间在灭菌锅中缺氧,造成培养基品质下降,培养基适用性失败且影响实验结果。

  ◆培养基浇碟

  50℃水浴锅取出后,一般5分钟之内将培养基浇置空平皿中。平皿冷却后,观察培养基表面有无水珠,若无水珠则可直接进行涂布操作。多余的培养基可以放置在生物安全柜中或置密封袋(不是呼吸袋)里2-8℃保存。

  若有水珠,若需要当天使用则打开平皿盖,轻轻甩掉表面的水珠,在运行的生物安全柜中放置0.5-1h直到表面没有水珠,然后进行涂布计数。

  若不需要当天使用:

  直接放置在生物安全柜中,盖上平皿,生物安全柜关机,7天内使用。

  装入自封袋中保存在2-8℃冰箱中,2周内使用。使用前,提前一天取出,使平皿中水珠自动蒸发消失。

情况②:培养后计数结果超标的原因在于菌悬液制备不均匀。

  每次制备的时候要涡旋3000转30s,使用前再涡旋3000转10s。特别是黑曲霉和白色念珠菌这种容易在底部沉底的菌,尤其需要注意。

情况③:培养后没有逐日观察,造成菌落生长成团。

  无法计数或计数结果统计错误,可以参考下图解决这个问题。


文章来源:微信公众号微生物菌种网

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