一、试验原理:
用于微生物动力、硫化氢及靛基质试验。
蛋白胨、胰酪蛋白胨提供生长所必需的营养物质,供微生物生长繁殖利用;琼脂提供支撑作用,有鞭毛的细菌在穿刺线周围扩散生长,无鞭毛的细菌则沿穿刺线生长;部分细菌可分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚,吲哚可与对二甲氨基苯甲醛反应形成玫瑰红色吲哚环,因此加入Kovacs试剂后,显红色即为靛基质试验阳性,无颜色改变则为阴性;微生物还原硫代硫酸盐或硫酸盐可产生硫化氢,并与亚铁离子反应产生黑色沉淀硫化亚铁,使生化管显黑色,即为硫化氢试验阳性。
二、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
6.0 |
氯化钠 |
5.0 |
硫代硫酸钠 |
0.2 |
胰酪蛋白胨 |
20 |
琼脂 |
3.5 |
硫酸亚铁铵 |
0.2 |
pH 7.3±0.2 25℃ |
三、试验方法:
1.由于SIM生化管培养基的琼脂含量较低,在运输途中会出现培养基在生化管内断裂的情况。经过实验证明,只需将SIM生化管置于沸水浴中5-10min,等培养基完全融化后,将SIM生化管正放,待培养基重新凝固后,可正常使用。
2.取新鲜质控菌株斜面,用接种针挑取菌苔穿刺接种至生化管内,30±1℃培养24-48h后,滴加Kovacs试剂,观察试验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,30±1℃培养24-48h:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
有动力,H2S-,吲哚+ |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
+++ |
有动力,H2S+,吲哚- |
单增李斯特氏菌 |
ATCC19114 |
+++ |
有动力,H2S-,吲哚- |
英诺克李斯特氏菌 |
ATCC33020 |
+++ |
有动力,H2S-,吲哚- |
福氏志贺氏菌 |
ATCC12022 |
+++ |
无动力,H2S-,吲哚- |
图1-1 SIM生化管质控结果
五、特别说明
SIM生化管培养基断裂融化再凝固后,不会对实验结果产生影响。
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