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Honda氏产毒肉汤的原理和使用方法

张宇名
录入时间:2023-5-18 15:04:23 来源:青岛银河澳门官网入口

一、试验原理

  本培养基用于致泻大肠埃希氏菌毒培养,致泻性大肠埃希氏菌分为:产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)、肠道侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)、肠道致病性大肠埃希氏菌(EPEC)、肠集聚性黏附性大肠埃希氏菌(EAEC)和肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC)5种。

  酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持细菌平衡的渗透压;磷酸氢二钾具有缓冲作用;葡萄糖为可发酵糖类;硫酸镁促进微生物生长发育;氯化铁、氯化钴能促进微生物毒素的产生;林可霉素(洁霉素)用于抑制厌氧菌和革兰阳性球菌生长,对革兰阴性菌以及真菌无活性。


二、培养基配方(g/L)

酪蛋白胨

20.0

酵母浸粉

10.0

氯化钠

2.5

磷酸氢二钾

15.0

葡萄糖

5.0

硫酸镁

0.025

氯化铁

0.0025

氯化钴

0.01

pH 7.5±0.1(25℃)


三、试验方法

  1、称取本品52.54g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,待冷却至45℃-50℃左右时,加入过滤除菌的林可霉素溶液(90μg/mL),混匀备用。

  2、制备菌种悬液,接种至Honda氏产毒肉汤中。

  3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养18h-24h。


四、质控结果

  接种以下质控菌株,放置36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养18h-24h。菌株培养结果见图1。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC 8739

10-100

+++

浑浊

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

10-100

+++

浑浊


图1 Honda氏产毒肉汤的微生物质控结果

图1 Honda氏产毒肉汤的微生物质控结果


五、注意事项

  1、培养基中含少量硫酸镁、氯化钴、氯化铁,灭菌后可能出现微量沉淀。

  2、林可霉素属于林可酰胺类抗生素,121℃高温易产生分解影响其功效,故采用过滤除菌方式在Honda氏产毒肉汤高压灭菌冷却后加入,务必避免一同高压灭菌。


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注:本文属银河澳门官网入口原创,未经允许不得转载。


 

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