大多数的有机酸都可通过微生物发酵途径来生产。到目前为止,约有80种有机酸可用微生物发酵法生产,如醋酸、乳酸、丙酸、丙酮酸、丁酸、苹果酸、延胡索酸、琥珀酸、a-酮戊二酸、柠檬酸、酒石酸、葡萄糖酸、衣康酸、曲酸、脂肪酸及长链二羧酸等。
许多微生物都能发酵生产有机酸,如细菌、酵母菌、霉菌及少数放线菌,但以霉菌种类最多。下面以柠檬酸为例,介绍有机酸的微生物发酵生产。
柠檬酸是一种重要的化工原料,广泛用于食品、医药等工业。食品工业 中,用量约占40%,常作为酸味剂加入饮料、果酱、糖果等食品中。医药工业中,用量约为30%,常作为调味剂用于糖浆、片剂。
柠檬酸过去从柑橘或菠萝中提取获得。 自从1917年第一次报告由黑曲霉浅盘表面培养生产柠檬酸以来,特别是1938年首次发表深层培养论文以来,柠檬酸逐渐改用液体深层发酵法进行生产。
(1)生产菌种
能产生柠檬酸的微生物很多,但以霉菌为主,如梨形毛霉、淡黄青霉、桔青霉、黑 曲霉、棒曲霉、文氏曲霉、宇佐美曲霉和绿色木霉等。其中黑曲霉和文氏曲霉产生柠檬酸的能力较强,并且能够利用多种碳源,因此常是生产上使用的菌种。但近年来,发现假丝酵母属 中一些种、某些细菌也能很好地生产柠檬酸,其中假丝酵母也已用于连续发酵。
(2)发酵原理
大多数学者认为柠檬酸发酵与三羧酸循环有着密切关系。在黑曲霉细胞内既存在三羧酸循环,也存在着乙醛酸循环;乌头酸酶或异柠檬酸脱氢酶可因某些因素,如金属离子的缺乏或代谢产物的存在,而受到抑制,这有利于柠檬酸的累积。 目前一般认为,柠檬酸的形成是依下列途径进行的:葡萄糖经EMP途径变为丙酮酸,丙酮酸由丙酮酸氧化酶氧化成乙酸和CO2,继而经乙酰磷酸形成乙酰辅酶A,然后由于柠檬酸合成酶的作用,乙酰辅酶A和草酰乙酸合成为柠檬酸。
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